專利名稱：淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用的制作方法
技術領域：
本發(fā)明涉及一種中藥提取物，具體涉及淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用。
背景技術：
近年來隨著生活水平的提高，心肌缺血嚴重危害中老年人的健康，冠狀動脈粥樣硬化呈現(xiàn)年輕化的趨勢，一些年輕人也出現(xiàn)心肌缺血的表現(xiàn)。心血管疾病，又稱為循環(huán)系統(tǒng)疾病，循環(huán)系統(tǒng)指人體內(nèi)運送血液的器官和組織，主要包括心臟和血管，可細分為急性和慢性，一般都與動脈硬化有關。
心肌缺血是指心臟的血液灌注減少，導致心臟的供氧量減少，心肌能量代謝不正常，不能支持心臟正常工作的一種病理狀態(tài)。冠狀動脈粥樣硬化導致的冠脈狹窄是引起心肌缺血最主要、最常見的病因，進而導致心肌缺血缺氧，因此冠心病是心肌缺血的主要原因。心肌缺血主要分為隱匿性冠心病、心絞痛型、心肌梗死型、缺血性心肌病和猝死性5類。心肌缺血常見的原因是冠狀動脈硬化，其次還有炎癥(風濕性、梅毒性、川崎病和血管閉塞性脈管炎等)、痙攣、栓塞、結(jié)締組織疾病、創(chuàng)傷和先天性畸形等多種。流行病學研究發(fā)現(xiàn)，與動脈粥樣硬化相關的重要危險因子為高脂血癥、高血壓病、糖尿病、吸煙、肥胖、同型半胱氨酸增高、體力活動少、高齡和男性等。缺血心肌的損傷機制包括能量缺乏、鈣超載、自由基生成增多、酸中毒引起的心肌損害、細胞膜通透性增加等方面。黃酮類化合物廣泛存在自然界的植物和果實中，現(xiàn)代藥理研究表明，黃酮類化合物具有多種生物活性，包括心血管系統(tǒng)活性，抗菌及抗病毒活性，抗腫瘤活性，抗氧化自由基活性，抗炎、鎮(zhèn)痛活性，保肝活性、降壓、降血脂、抗衰老、提高機體免疫力、瀉下、鎮(zhèn)咳、祛痰、解痙及抗變態(tài)等藥理活性。淡竹葉為禾本科植物淡竹葉的干燥莖葉，淡竹葉總黃酮提取物是南京中醫(yī)藥大學開發(fā)的一種植物類黃酮制劑，其發(fā)明專利“一種淡竹葉精制總黃酮的制備方法CN101797344A公開了一種淡竹葉總黃酮的制備精制方法。但迄今為止，尚無淡竹葉總黃酮對心肌缺血疾病的生理和藥理活性的研究報道。因此為了充分利用資源，滿足市場需求，很有必要研究開發(fā)一種具有很好防治心肌缺血疾病的藥物。

發(fā)明內(nèi)容
發(fā)明目的本發(fā)明的目的是為了解決現(xiàn)有技術的不足，經(jīng)過大量實驗篩選，提供淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用。技術方案為了實現(xiàn)以上目的，本發(fā)明采用如下技術方案淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮由下列方法制備得到
(I)取新鮮淡竹葉、洗凈、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加熱回流I 3次，過濾、合并提取液，濃縮，得淡竹葉的水提液備用；(2)取步驟(I)得到的淡竹葉水提液加入乙醇使淡竹葉水提液中乙醇的濃度達到65% 75%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得淡竹葉水提液的醇沉液待用；(3)取步驟(2)得到的淡竹葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為50% 55%的乙醇洗脫，薄層色譜檢識、收集50% 55%乙醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到淡竹葉總黃酮。作為優(yōu)選方案，以上所述的淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮包括葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素。本發(fā)明提供的淡竹葉總黃酮中黃酮含量高，具有葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素等黃酮，含量高達50至90%。實驗結(jié)果表明具有很好的抗心肌缺血的作用。淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、^ -受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮由下列方法制備得到(I)取新鮮淡竹葉、洗凈、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加熱回流I 3次，過濾、合并提取液，濃縮，得淡竹葉的水提液備用；(2)取步驟(I)得到的淡竹葉水提液加入乙醇使淡竹葉水提液中乙醇的濃度達到65% 75%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得淡竹葉水提液的醇沉液待用；(3)取步驟(2)得到的淡竹葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為50% 55%的乙醇洗脫，薄層色譜檢識、收集50% 55%乙醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到淡竹葉總黃酮。作為優(yōu)選方案，以上所述的淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、P -受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮包括葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素。淡竹葉總黃酮具有很好的抗血栓、抗血小板聚集等功效，本發(fā)明在淡竹葉總黃酮的基礎之上，通過大量實驗篩選組合，實驗結(jié)果表明，淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、^ -受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液組合之后，具有更好的抗心血管疾病的作用。作為優(yōu)選方案，以上所述的抗血小板聚集藥物可為阿司匹林、P -受體阻斷劑可為普萘洛爾、鈣離子拮抗劑可為維拉帕米等、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物可為硝酸地平等。作為優(yōu)選方案，本發(fā)明提供的淡竹葉總黃酮或淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、￠-受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在防治冠心病、隱匿性冠心病、心絞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病等心血管疾病中的應用。本發(fā)明提供的淡竹葉總黃酮可與藥學上可接受的載體制成湯劑、口服液、沖劑、糖漿劑、片劑、膠囊劑、顆粒劑、散劑、丸劑、滴丸劑、膏劑等劑型的藥物。在制成片劑時把淡竹葉總黃酮和載體乳糖或玉米淀粉，需要時加入潤滑劑硬脂酸鎂，混合均勻，然后壓片制成片劑。在制成膠囊劑時把淡竹葉總黃酮和載體乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，然后裝膠囊制成膠囊劑。在制成顆粒劑時，把淡竹葉總黃酮和稀釋劑乳糖或玉米淀粉混合均勻，整粒，干燥，制成顆粒劑。有益效果本發(fā)明與現(xiàn)有技術相比具有以下優(yōu)點(I)本發(fā)明提供的淡竹葉總黃酮經(jīng)過優(yōu)選工藝制備得到，含黃酮種類多，純度高，
實驗結(jié)果表明淡竹葉總黃酮安全無毒無副作用，對二甲苯所致耳腫脹模型有明顯的抑制作用；可抑制血小板聚集，延長血栓形成時間；對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注損傷有較好的保護作用。(2)本發(fā)明以優(yōu)選工藝制備得到的淡竹葉總黃酮為基礎，通過大量實驗篩選，淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、P -受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷齊U、硝酸脂類藥物、溶栓藥物或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑組合后顯示出了很好的抗血小板聚集，延長血栓形成時間，并對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注損傷有更好的保護作用，起到了較好的協(xié)同增效功效，從而臨床可以減少藥物用量，降低不良反應，更加科學化用藥，具有更好的應用前景。
具體實施例方式根據(jù)下述實施例，可以更好地理解本發(fā)明。然而，本領域的技術人員容易理解，實施例所描述的具體的物料配比、工藝條件及其結(jié)果僅用于說明本發(fā)明，而不應當也不會限制權(quán)利要求書中所詳細描述的本發(fā)明。實施例I一種淡竹葉總黃酮，它是通過以下方法制備得到(I)取新鮮淡竹葉、洗凈、干燥后放入提取罐中，加10倍量的水，加熱回流3次，過濾、合并提取液，濃縮，得淡竹葉的水提液備用；(2)取步驟⑴得到的淡竹葉水提液加入乙醇使淡竹葉水提液中乙醇的濃度達到65% 75%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得淡竹葉水提液的醇沉液待用；(3)取步驟(2)得到的淡竹葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%乙醇洗脫，再用濃度為50% 55%的乙醇洗脫，薄層色譜檢識、收集50% 55%乙醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到淡竹葉總黃酮。經(jīng)高效液相和質(zhì)譜連用技術檢測表明，淡竹葉總黃酮中含有葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素。實施例2急性毒性實驗及最大給藥量測定實施例I制備得到的淡竹葉總黃酮灌胃給藥的最大給藥量試驗結(jié)果表明20只小鼠給藥后均無毒性反應，主要組織器官均無明顯的改變，7天內(nèi)無死亡。淡竹葉總黃酮灌胃給藥的小鼠最大給藥量為14. 14g Ag'該劑量相當于藥效學最大給藥劑量的176. 8倍。表明本發(fā)明提供的淡竹葉總黃酮從天然淡竹葉中分離得到，毒性低，安全性好。實施例3抗炎實驗
取雌性小鼠50只，體重(20±3)g，由南京中醫(yī)藥大學動物實驗中心提供。隨機分成空白對照組、二甲苯組、實施例I制備得到的淡竹葉總黃酮高、中、低共5組，每組10只。給藥組動物連續(xù)灌胃給藥7天，空白對照組給予等容積的生理鹽水。末次給藥Ih后,在每只小鼠的右耳前后兩面各涂25ii I的二甲苯，2h以后,將動物處死,用8mm直徑打孔器分別在雙耳的同一部位打下圓耳片，分析天平稱重。每鼠的右耳片重量減去左耳片重即為腫脹度。與空白對照組和二甲苯模型組比較，具體實驗結(jié)果如表I所示。表I淡竹葉總黃酮對二甲苯所致小鼠耳腫脹度的影響(x±s, n=10)
權(quán)利要求
1.淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮由下列方法制備得到 (1)取新鮮淡竹葉、洗浄、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加熱回流I 3次，過濾、合并提取液，濃縮，得淡竹葉的水提液備用； (2)取步驟(I)得到的淡竹葉水提液加入こ醇使淡竹葉水提液中こ醇的濃度達到65% 75%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得淡竹葉水提液的醇沉液待用； (3)取步驟(2)得到的淡竹葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%こ醇洗脫，再用濃度為50% 55%的こ醇洗脫，薄層色譜檢識、收集50% 55%こ醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到淡竹葉總黃酮。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，其特征在于，所述的淡竹葉總黃酮包括葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素。
3.淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、β_受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，所述的淡竹葉總黃酮由下列方法制備得到 (1)取新鮮淡竹葉、洗浄、干燥后放入提取罐中，加5 10倍量的水，加熱回流I 3次，過濾、合并提取液，濃縮，得淡竹葉的水提液備用； (2)取步驟(I)得到的淡竹葉水提液加入こ醇使淡竹葉水提液中こ醇的濃度達到65% 75%，靜置、沉淀，濾出溶液，濃縮，得淡竹葉水提液的醇沉液待用； (3)取步驟(2)得到的淡竹葉醇沉液上大孔樹脂柱，先分別用水和濃度為10%こ醇洗脫，再用濃度為50% 55%的こ醇洗脫，薄層色譜檢識、收集50% 55%こ醇洗脫液、濃縮、減壓干燥得到淡竹葉總黃酮。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、β-受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，其特征在于，所述的淡竹葉總黃酮包括葒草苷、異葒草苷、日當藥黃素、當藥黃素、牡荊苷、異牡荊苷、木犀草苷和苜蓿素。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述的淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、β-受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，其特征在于，所述的抗血小板聚集藥物為阿司匹林、硝酸脂類藥物為硝酸地平。
6.根據(jù)權(quán)利要求I所述的淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，其特征在于，所述的心肌缺血疾病為冠心病、隱匿性冠心病、心絞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病。
7.根據(jù)權(quán)利要求3或4所述的淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、β-受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物、血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑或丹參注射液的組合物在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，其特征在于，所述的心肌缺血疾病為冠心病、隱匿性冠心病、心絞痛、心肌梗死、或缺血性心肌病。
全文摘要
本發(fā)明公開了淡竹葉總黃酮在制備防治心肌缺血疾病的藥物及功能性食品中的應用，實驗結(jié)果表明淡竹葉總黃酮安全無毒無副作用，對二甲苯所致耳腫脹模型有明顯的抑制作用；可抑制血小板聚集，延長血栓形成時間；對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注損傷有較好的保護作用。并且本發(fā)明通過大量實驗篩選結(jié)果表明，淡竹葉總黃酮與抗血小板聚集藥物、β-受體阻斷劑、鈣離子拮抗劑、他汀類藥物、RAS系統(tǒng)阻斷劑、硝酸脂類藥物、溶栓藥物或血管緊張素轉(zhuǎn)換酶抑制劑組合后顯示出了更好的抗血小板聚集，延長血栓形成時間，并對垂體后葉素所致大鼠心肌缺血和大鼠心肌缺血再灌注損傷有更好的保護作用，起到了較好的協(xié)同增效功效。
文檔編號A61K36/899GK102698116SQ20121022604
公開日2012年10月3日 申請日期2012年7月3日 優(yōu)先權(quán)日2012年7月3日
發(fā)明者樂巍, 吳啟南, 周婧, 王新勝, 邵瑩, 陳廣云 申請人:南京中醫(yī)藥大學