專利名稱：1,2,4－苯并三嗪氧化物的口服凝膠膠囊配方的制作方法
背景技術(shù)：
發(fā)明領(lǐng)域本發(fā)明涉及癌瘤的治療領(lǐng)域。更具體說，本發(fā)明涉及用含在口服的膠囊包封懸浮液中的1，2，4-苯并三嗪氧化物治療癌瘤。
報道的進(jìn)展用膠囊包封的懸浮液和溶液作為藥物載體在現(xiàn)有技術(shù)中是已知的。比如美國專利No.4,701,327公開了由其中包裹了鬼臼乙叉甙溶液的軟明膠殼體構(gòu)成的鬼臼乙叉甙軟膠囊；歐洲專利說明書出版號No.0 341,584B1公開了包括了在聚乙二醇溶液中的吡苯氧磺鈉的軟膠囊制劑；而英國專利申請書No.2,229,094公開了由脂肪酸甘油酯和/或礦物油或液體石蠟構(gòu)成的作為呋喃硝胺的載體的明膠膠囊。
軟膠囊或硬膠囊的液體充填物提供了將藥物進(jìn)行配方的有用的和有利的手段，使得活性物能以半固態(tài)、液態(tài)或膏狀物的形態(tài)加入。在大多數(shù)由現(xiàn)有技術(shù)提供的軟凝膠膠囊中，主要的目標(biāo)包括儲存期穩(wěn)定性和有效的吸收性能或生物利用度。
在癌瘤治療領(lǐng)域中，抗癌藥物的快速和有效的吸收是最重要的，所以為成功地攻擊癌細(xì)胞制定劑量/時間服藥法。比如，當(dāng)準(zhǔn)備增大化療藥物對實體癌瘤的毒性時，就給病人服用增強(qiáng)細(xì)胞毒的化合物，在隨后的某個時間周期內(nèi)服用化療藥物，以使該藥物具有增效作用。真對這兩種藥物的迅速和完全的吸收使得醫(yī)生可以設(shè)定服藥的時間間隔，以得到最大的功效。對于抗腫瘤藥物，腸道外給藥是最普遍的。然而，這樣的給藥方式是有痛感的，而且由醫(yī)生操作不方便且費(fèi)用高。在治療癌瘤時，口服的給藥途徑將消除這個缺點。
本發(fā)明的目標(biāo)是提供用1，2，4-苯并三嗪氧化物制劑的膠囊，當(dāng)給病人服用此膠囊時，1，2，4-苯并三嗪氧化物能從中快速而完全地被吸收。此外，在儲存期該制劑是穩(wěn)定的。
1，2，4-苯并三嗪氧化物是已知的化合物。美國專利No.3,980,779公開了如下式的3-氨基-1，2，4-苯并三嗪-1，4-二氧化物組合物作為用于促進(jìn)牲畜生長的抗生素組合物
其中R和R1中有一個是氫、鹵素、低級烷基、鹵代低級烷基、低級烷氧基、氨基甲酰基、亞磺酰氨基。羧基或羰基低級烷氧基，而R和R1中的另一個是鹵素、低級烷基、鹵代低級烷基、低級烷氧基、氨基甲?；?、亞磺酰氨基、羧基或羰基低級烷氧基。
1992年12月29日發(fā)行的美國專利5,175,287公開了使用1，2，4-苯并三嗪氧化物與放射線一起治療腫瘤。1，2，4-苯并三嗪氧化物使腫瘤細(xì)胞對射線敏感化，使其對這種治療方式更適合。
霍爾頓(Holden)等人(1992)在《在FSaIIC鼠纖維肉瘤中使用SR-4233增強(qiáng)烷基化試劑的活性》(載JNCI 84187-193)公開了與抗腫瘤烷基化試劑一起使用SR-4233，即3-氨基-1，2，4-苯并三嗪-1，4-氧化物，也是已知的，在下文中有時將其稱作Tirapazamine。對順鉑、環(huán)磷酰胺、卡氮芥和苯丙胺酸氮芥四種抗腫瘤烷基化試劑每一種進(jìn)行了測試，以檢驗Tirapazamine克服缺氧腫瘤細(xì)胞對抗腫瘤烷基化試劑耐受力的活性。單獨地和與各種不同數(shù)量的抗腫瘤烷基化試劑協(xié)同地測試了Tirapazamine。當(dāng)用單劑的環(huán)磷酰胺、卡氮芥或苯丙卡氮芥治療之前服用SR-4233時，觀察到導(dǎo)致對腫瘤細(xì)胞的增效細(xì)胞毒效果的明顯的劑量增強(qiáng)作用。
國際申請?zhí)朜o.PCT/US89/01037公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物作為放射增敏劑和選擇性細(xì)胞毒試劑。其他的有關(guān)專利包括公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物的制備方法的美國專利3,868,372和4,001,410和公開了1，2，4-苯并三嗪氧化物衍生物的美國專利3,991,189和3,957,799。
發(fā)明概要本發(fā)明提供了包括以精椰子油制劑或大豆油制劑為載體，混合有式(I)的化合物或所述化合物的可藥用鹽的膠囊制劑
式中X是氫、(1-4碳)烴基、OH，NH2，NHR或NRR取代的(1-4碳)烴基、鹵素、羥基、(1-4碳)烷氧基、NH2、NHR或NRR，其中R獨立地選自(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基，以及被羥基、NH2、(1-4碳)烷基的仲氨基和二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級?；划?dāng)X是NRR時，兩個R一起直接或通過一個氧橋形成嗎啉環(huán)、吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)；n是0或1；以及Y1和Y2獨立地是H、硝基、鹵素、(1-14碳)烴基[包括環(huán)烴和不飽和烴基，可任意地被一個或兩個選自鹵素、羥基、環(huán)氧基、(1-4碳)烷氧基、(1-4碳)烷硫基、伯氨基(NH2)、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、其中兩個烷基連在一起形成嗎啉環(huán)、吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)的二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)酰氧基、(1-4碳)酰氨基及其硫代的類似物、(1-4碳的)乙酰胺烷基、羧基、(1-4碳)烷氧羰基、氨基甲?；?1-4碳)烷基氨基甲?；?1-4碳)烷基磺?；?1-4碳)烷基磷酰基的取代基取代]，其中該烴基可任意地插入一個單醚鍵(-O-)；或Y1和Y2也可以獨立地是嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、NH2、NHR’、NR’R’O(CO)R’、NH(CO)R’、O(SO)R’或O(POR’)R’，其中R’是可以任意地被羥基、氨基、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)烴基。
在本發(fā)明中使用的優(yōu)選化合物是3-氨基-1，2，4-苯并三嗪氧化物(Tirapazamine)。
本發(fā)明也涉及一種癌瘤的治療方法，該方法包括給需要進(jìn)行此治療的哺乳動物服用有效數(shù)量的如本文所定義的口服制劑。
該口服制劑裝在軟的或硬的明膠膠囊中。膠囊的總重量含量為200～2000mg，包括5～50％(w/w)的式(I)化合物；50～95％(w/w)的精椰子油或大豆油的油質(zhì)賦形劑；0～30％(w/w)，優(yōu)選10～20％(w/w)的單一的或混用的粘度改進(jìn)劑，其例子為加氫植物油、黃蠟和一硬脂酸甘油酯；以及0～10％(w/w)，優(yōu)選2～8％(w/w)的單一的或混用的可藥用表面活性劑，其例子為單月桂酸縮水山梨糖醇酯，聚山梨酸酯20、40、60和80，卵磷脂和Potoxamer 124、188、237、338和407。
發(fā)明的詳細(xì)敘述抗腫瘤劑本發(fā)明提供一種治療哺乳類動物的癌瘤，包括人類癌瘤，特別是實體癌瘤的組合物和治療方法。在本發(fā)明的這一方面，給生有癌瘤并需要這樣治療的哺乳動物，在施用有效量的癌瘤敏感的化療藥劑之前大約半小時至大約24小時，施用含在軟凝膠膠囊中的有效量的如在本文中所定義的式(I)的化合物。在1993年9月22日登記的美國專利申請系列號No.125,609中敘述了式(I)和化合物的測試，其內(nèi)容全部引入本文作為參考。
正如在本文中使用的，將腫瘤對化療藥劑的敏感性看作是一種化療藥劑通過任何機(jī)理，比如殺死腫瘤細(xì)胞、減少細(xì)胞增殖或減小腫瘤大小，可以發(fā)揮的治療效果。也是正如在本文中使用的，有效量的如本文所定義的式(I)化合物指的是能夠殺死腫瘤細(xì)胞或能夠與化療藥劑協(xié)同殺死腫瘤細(xì)胞的數(shù)量。有效量的化療藥劑指的是能夠殺死癌細(xì)胞或產(chǎn)生別樣的治療效果，比如減小腫瘤的尺寸或減緩腫瘤細(xì)胞生長和增殖的化療藥劑的量。
抗腫瘤藥劑的凝膠膠囊載體在制備本發(fā)明的軟凝膠膠囊時，進(jìn)行了廣泛的研究，提供了將給出相同的穩(wěn)定性和可快速吸收的軟凝膠膠囊的特性。適當(dāng)?shù)妮d體包括精椰子油花生油大豆油PEG 400按照如下的方法進(jìn)行初步的制備將1.0g Tirapazamine加到各9.0g的每種載體中，放到帶羅口蓋子的玻璃瓶中，進(jìn)行物理穩(wěn)定性和化學(xué)穩(wěn)定性評價。
物理穩(wěn)定性 將藥物/載體混合物(在羅口玻璃瓶中5mL)進(jìn)行每24小時的溫度循環(huán)(5℃～40℃)，并在第0、1、2和4周進(jìn)行顆粒度監(jiān)測。
化學(xué)穩(wěn)定性 將藥物/載體混合物(在羅口玻璃瓶中5mL)在70℃儲存4周，將物理穩(wěn)定性(顆粒度增加)方面顯示出極小變化或沒有變化的試樣進(jìn)行分析測試化學(xué)穩(wěn)定性。
物理/化學(xué)研究表明，精椰子油和大豆油將適合進(jìn)一步的實驗，而花生油和PEG400發(fā)現(xiàn)是不能接受的?；瘜W(xué)穩(wěn)定性的數(shù)據(jù)示于表1。因此，使用理論確定的有效藥物量制備含有表面活性劑的精椰子油和大豆油制劑(實施例1和2)1.稱量所需數(shù)量的藥物。
2.將油和乳化劑混合物加入到藥物中。
3.在大約40℃下熔化混合脂(20％的黃蠟+80％w/w的加氫植物油)并加到步驟2中。
4.在Ultra Turrax均化器中均化混合物3×1分鐘。
表I在70℃6周后用液相色譜測定Tirapazamine/載體的重量估計總不均勻度(ETI)百分?jǐn)?shù)70℃/4周載體初始 A B精椰子油0.30 0.26 0.21花生油 0.24 1.92 1.94大豆油 0.27 1.91 1.90PEG 400 0.24 19.11 19.13實施例1Tirapazamine50mg精椰子油269mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯13mg黃蠟25.8mg加氫植物油 103.2mg總計 441mg實施例2Tirapazamine50mg大豆油 245mg卵磷脂 5mg黃蠟25.2mg加氫植物油 101.8mg總計 427mg對制劑實施例1和2進(jìn)行了顆粒度和化學(xué)分析，結(jié)果列在表II和表III中。
表II對制劑實施例1和實施例2在70℃下儲存4周用激光衍射測定平均顆粒度(μm)顆粒度μm時間點(周) 實施例4 實施例50 90.8 143.11 113.2120.22 133.9147.14 136.7149.7在5℃/40℃循環(huán)下4周相對于ETI兩個制劑都是穩(wěn)定的。
表III在70℃和5℃/40℃之間溫度循環(huán)下儲存4周后，用液相色譜測定制劑實施例1和實施例2的重量估計總不均勻度(ETI)的百分?jǐn)?shù)70℃ 5-40℃制劑初始 4周 4周實施例1 0.27 3.41 0.15實施例2 0.20 3.11 0.16無論是用精椰子油還是大豆油制劑，在4周內(nèi)藥物的顆粒度都沒有明顯的變化。雖然在70℃/4周后觀察到明顯的降解。當(dāng)儲存在5℃/40℃時，兩種制劑都是化學(xué)穩(wěn)定的。
制備好的膠囊其目標(biāo)充填重量是280mg(+/-10％)，因此必須對制劑實施例1和2進(jìn)行調(diào)節(jié)。得到的制劑顯示在實施例3和4中。
實施例3Tirapazamine50mg精椰子油175.9mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯9.30mg黃蠟8.96mg加氫植物油 35.84mg總計 280mg
實施例4Tirapazamine 50mg大豆油178.5mg卵磷脂3.68mg黃蠟 7.56mg加氫植物油30.26mg總計 270mg在17周的時期內(nèi)，和在不同的儲存條件下進(jìn)行制劑實施例3和4的化學(xué)分析。結(jié)果示于表IV。
表IV在儲存17周后，用液相色譜測定Tirapazamine的制劑實施例3和4的估計總不均勻度(ETI)百分?jǐn)?shù)在儲存17周后精椰子油制劑的ETI結(jié)果初始0.411周 4周17周條件 A B A B A B5℃ 0.28 0.3230℃ 0.370.27 0.38 0.22 0.50 0.4730℃/75％ 0.220.18 0.24 0.32 0.46 0.49RH40℃ 0.210.25 0.38 0.48 1.15 2.87在儲存17周后大豆油制劑的ETI結(jié)果初始2.3917周條件 A B30℃ 0.941.0230℃/75％RH0.840.7440℃ 4.524.06A和B表示雙份分析在40℃17周后兩個制劑實施例3和4都顯示出明顯的降解。大豆油制劑實施例在30℃表現(xiàn)出一些降解，而精椰子油制劑則無。
單位劑量/mg的優(yōu)選制劑和物理/化學(xué)穩(wěn)定性顯示在制劑實施例5中。
實施例5Tirapazamine50mg精椰子油175.9mg單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯9.26mg加氫植物油 37mg黃蠟7.4mg總計 280mg以2.1Kg的規(guī)模制造制劑實施例5。將加氫植物油和黃蠟稱量到容器中。將容器加熱并攪拌內(nèi)容物直至熔化。充分混合精椰子油和單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯，然后加入到熔融的加氫植物油/黃蠟混合物中。溫?zé)岬玫降幕旌衔锊嚢瑁敝恋玫骄鶆虻幕旌衔?。然后邊攪拌邊向混合物中加入Tirapazamine。將得到的懸浮液進(jìn)行均勻化。
制劑實施例5對于向膠囊充填顯示出良好的物理特性。這種膏狀物表現(xiàn)出良好的剪切稀化流動特性，在放置18小時以后也不分離。發(fā)現(xiàn)這種制劑可以在軟明膠膠囊充填機(jī)上加工。表V顯示在制造2.1Kg一批的制劑實施例5的過程中所取的“在線”數(shù)據(jù)。表VI顯示在將此懸浮物充填到軟明膠膠囊的過程中所取的“在線”數(shù)據(jù)。
表V對于Tirapazamine軟明膠膠囊懸浮物制備中的在線分析(用紫外線檢測)試樣點Mg/280權(quán)利要求的％50mg/280mg頂47.62 95.2446.71 93.42底48.22 96.4448.65 97.30中間 47.80 95.60
表VI在充填軟凝膠膠囊時所取的在線試樣的分析在充填的開始、中間和結(jié)束時所取的膠囊(5個膠囊的平均值)進(jìn)桿液相色譜試驗取樣點 Mg/膠囊 理論值的％ ％相對標(biāo)準(zhǔn)偏差開始 50.12100.2 2.18中間 50.67101.3 0.70末尾 48.7797.50.98在充填的開始、中間和結(jié)束時所取的膠囊(5個膠囊的平均值)的重量均勻度取樣點mg范圍/mg開始 284.97278.09-288.19中間 286.09285.14-286.87末尾 282.03278.71-284.41參考優(yōu)選實施方案敘述了本發(fā)明，應(yīng)該理解，在本發(fā)明范圍內(nèi)的任何改變對本領(lǐng)域的專業(yè)人員都是不言而喻的。
權(quán)利要求
1.一種包括了明膠殼體內(nèi)所包封的約200～約2000mg的總內(nèi)容物重量的如下成分的明膠膠囊大約5～約50％(w/w)的如下式抗癌化合物或所述化合物的可藥用的鹽
式中X是氫；(1-4碳)烴基；OH，NH2，NHR或NRR取代的(1-4碳)烴基；鹵素；羥基；(1-4碳)烷氧基；NH2；NHR或NRR，其中R獨立地選自(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級酰基，以及被羥基、NH2、(1-4碳)烷基的仲氨基和二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)低級烷基和(1-4碳)低級?；?；當(dāng)X是NRR時，兩個R一起直接或通過一個氧橋形成嗎啉環(huán)、吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)；n是0或1；以及Y1和Y2獨立地是H、硝基、鹵素、(1-14碳)烴基[包括環(huán)烴和不飽和烴，可任意地被一個或兩個選自鹵素、羥基、環(huán)氧基、(1-4碳)烷氧基、(1-4碳)烷硫基、伯氨基(NH2)、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、其中兩個烷基連在一起形成嗎啉環(huán)、吡咯烷環(huán)或哌啶環(huán)的二((1-4碳)烷基)叔氨基、(1-4碳)酰氧基、(1-4碳)酰氨基及其硫代的類似物、(1-4碳)的乙酰胺烷基、羧基、(1-4碳)烷氧羰基、氨基甲?；?、(1-4碳)烷基氨基甲酰基、(1-4碳)烷基磺酰基或(1-4碳)烷基磷酰基的取代基取代]，其中該烴基可任意地插入一個單醚鍵(-O-)；或Y1和Y2也可以獨立地是嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、NH2、NHR’、NR’R’O(CO)R’、NH(CO)R’、O(SO)R’或O(POR’)R’，其中R’是可以被羥基、氨基、(1-4碳)烷基仲氨基、二((1-4碳)烷基)叔氨基、嗎啉基、吡咯烷基、哌啶基、(1-4碳)烷氧基或鹵素取代的(1-4碳)烴基；大約50％～大約95％(w/w)的選自大豆油和精椰子油的油質(zhì)賦形劑；大約0％～大約30％(w/w)的粘度改良劑；大約0％～大約10％(w/w)的可藥用表面活性劑。
2.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的抗癌瘤化合物是3-氨基-1，2，4-苯并三嗪。
3.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的抗癌瘤化合物的含量占所述制劑的大約10％～大約25％(w/w)。
4.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的油質(zhì)賦形劑占所述制劑的大約60％～大約80％(w/w)。
5.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的粘度改良劑選自加氫植物油和黃蠟和一硬脂酸甘油酯。
6.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的可藥用表面活性劑選自單月桂酸脫水山梨(糖)醇酯和卵磷酯。
7.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的粘度改良劑的含量占所述制劑的大約10％～大約20％(w/w)。
8.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的表面活性劑的含量占所述制劑的大約2％～大約8％(w/w)。
9.如權(quán)利要求1的明膠膠囊，其中所述的明膠膠囊是軟明膠膠囊。
10.治療哺乳動物癌瘤的方法，該方法包括給需要進(jìn)行這種治療的所述哺乳動物施用有效量的權(quán)利要求1的明膠膠囊。
全文摘要
公開了含有1,2,4－苯并三嗪氧化物和選自大豆油和精椰子油的油質(zhì)賦形劑的抗癌瘤軟明膠膠囊。
文檔編號A61K47/14GK1200669SQ96197966
公開日1998年12月2日 申請日期1996年8月21日 優(yōu)先權(quán)日1995年9月12日
發(fā)明者S·布朗, R·布倫德爾 申請人:圣諾菲藥品有限公司