專(zhuān)利名稱(chēng)：一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法及其應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬于中藥制藥技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法及其應(yīng)用。

背景技術(shù)：
心腦血管疾病一直困撓著西方發(fā)達(dá)國(guó)家，其死亡率位居各種疾病之首。據(jù)統(tǒng)計(jì)，美國(guó)心腦血管疾病死亡人數(shù)竟占到疾病死亡總?cè)藬?shù)的50％，成為威脅人類(lèi)健康的第一殺手。近年來(lái)，隨著我國(guó)經(jīng)濟(jì)快速發(fā)展和人民生活水平的提高，冠心病、腦卒中、高血壓等心腦血管疾病的發(fā)病率和死亡率也直線上升。我國(guó)每年有250萬(wàn)人死于心腦血管疾病，而且還以每年新發(fā)130-150萬(wàn)例的速度在增長(zhǎng)。燈盞細(xì)辛又名燈盞花、燈盞菊、土細(xì)辛、土朝陽(yáng)、土頂草、土菊、雙葵花等，為菊科植物短葶飛蓬Erigeron breviscapus(Vant.)Hand.-Mazz.的全草。分布于我國(guó)云南、湖南、廣東、廣西、貴州、四川等地。性味甘溫，具有散寒解表，活血舒筋，擴(kuò)張微細(xì)動(dòng)脈，改善微循環(huán)，增加組織灌注量，降低血液粘滯度等功能。臨床用于治療高血壓、腦溢血、腦血栓形成、腦栓塞、冠心病、心絞痛等病癥具有特殊療效，尤其用于治療心腦血管缺血性疾病方面療效顯著，燈盞細(xì)辛已收入2005版《中華人民共和國(guó)藥典》第一部。
自20世紀(jì)70年代中期開(kāi)始，國(guó)內(nèi)對(duì)燈盞細(xì)辛進(jìn)行深入的化學(xué)成分研究，確定其中含有黃酮、吡喃酮、植物甾醇焦性?xún)翰璺拥瘸煞郑颇纤幬镅芯克难芯咳藛T通過(guò)研究確認(rèn)燈盞乙素為其主要的活性成分，并把含有少量燈盞甲素的混和物通稱(chēng)為燈盞花素，化合物中燈盞乙素的含量在90％以上。燈盞花素因其確切的心腦血管方面的療效而被開(kāi)發(fā)成片劑、膠囊、注射劑等多種劑型，在臨床上得到廣泛的應(yīng)用。隨著對(duì)燈盞細(xì)辛研究的不斷深入，從中分離得到另外一類(lèi)活性成分即咖啡酸奎寧酸酯化合物，該類(lèi)化合物與活性成分燈盞乙素具有協(xié)同作用，可以增加燈盞花素心腦血管方面的活性。專(zhuān)利CN01115358.X公開(kāi)了一種野黃芩苷和咖啡?？鼘幩岬乃幱媒M合物，該組合物從燈盞花提取制得時(shí)，僅通過(guò)水煎或酒精回流提取，提取液經(jīng)正丁醇萃取、干燥而得，該提取物因?qū)嵤┘夹g(shù)的限定，使得提取物含有很多植物來(lái)源的蛋白、粘液質(zhì)大分子雜質(zhì)，不適合制成注射制劑。專(zhuān)利CN03117754.9公開(kāi)了“燈盞細(xì)辛酚及其制備方法和在制藥中的應(yīng)用”，其燈盞細(xì)辛有效部位燈盞細(xì)辛酚的制備方法，雖然用大孔樹(shù)脂進(jìn)行分離，但是沒(méi)有對(duì)大孔樹(shù)脂優(yōu)選，同時(shí)應(yīng)用有機(jī)溶媒醋酸乙酯萃取提取總咖啡酸酯，該制備方法實(shí)用性不強(qiáng)，分離過(guò)程采用大量的有機(jī)試劑故不利于工業(yè)生產(chǎn)。
目前中藥制劑的應(yīng)用日益廣泛，人們普遍認(rèn)為中藥藥性平和，副作用小，安全可靠，但隨著中藥新品種及新劑型的不斷出現(xiàn)，特別是中藥注射劑的廣泛應(yīng)用，不良反應(yīng)問(wèn)題日益突出，其中熱原反應(yīng)和過(guò)敏反應(yīng)最為嚴(yán)重。中藥注射劑誘發(fā)過(guò)敏反應(yīng)的物質(zhì)很多，其中蛋白質(zhì)、多肽、多糖等大分子物質(zhì)為全抗原，對(duì)中藥注射劑的質(zhì)量影響最大，制備過(guò)程中應(yīng)采取有效措施去除這些物質(zhì)，以保證制劑的安全性，提高中藥注射劑的質(zhì)量。


發(fā)明內(nèi)容
基于上述原因，本發(fā)明研究人員經(jīng)過(guò)大量試驗(yàn)研究，通過(guò)陶瓷膜超濾去除提取液中的蛋白質(zhì)、粘液質(zhì)等大分子過(guò)敏原和熱原物質(zhì)，進(jìn)行有效成分的富集；再利用大孔樹(shù)脂吸附性和篩性的原理以及燈盞細(xì)辛中化學(xué)成分理化性質(zhì)的差異性，使燈盞細(xì)辛中含有的親水性成分黃酮苷燈盞乙素和咖啡酰類(lèi)成分可以分別被有效的純化。因此本研究將回收乙醇后的水提取液通過(guò)陶瓷膜超濾去除植物性大分子物質(zhì)和熱原物質(zhì)，同時(shí)富集有效成分；超濾液經(jīng)過(guò)大孔樹(shù)脂柱，蒸餾水洗脫雜質(zhì)后，再用適當(dāng)溶劑進(jìn)行梯度洗脫，從而達(dá)到分離、純化的目的。采用該工藝制備方法提取得到的燈盞細(xì)辛有效部位其總酚性物質(zhì)含量為70-90％，其中燈盞乙素含量為42-50％。采用本發(fā)明提取工藝制備的提取物有效成分含量高、溶解性好、理化性質(zhì)穩(wěn)定。由該提取物制成的注射制劑安全性更好、刺激性小，質(zhì)量穩(wěn)定，能顯著提高散寒解表，活血化瘀等功效。
本發(fā)明旨在提供一種理化性質(zhì)穩(wěn)定、安全、適合大工業(yè)生產(chǎn)的燈盞細(xì)辛注射制劑。
本發(fā)明還提供了燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法。
本發(fā)明通過(guò)以下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn) 一、工藝制法 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用6-8倍量的50-80％乙醇水溶液回流提取三次，每次1.5-3h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用堿液調(diào)節(jié)pH值6.5-8.0，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.0-6.0，減壓濃縮至1-3g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用20-40％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.0-2.0，靜置12-30h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶3-5次得精制燈盞乙素；再用40-70％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH值6.5-7.0，灌裝，滅菌，即得； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入凍干賦形劑，調(diào)pH值6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，即得； 在本發(fā)明有效部位的制備工藝中，過(guò)濾優(yōu)選不低于300目的濾布。
在本發(fā)明中調(diào)節(jié)pH值的堿液優(yōu)選氫氧化鈉。
在本發(fā)明中超濾用陶瓷膜的截留分子量?jī)?yōu)選1-3萬(wàn)。
本發(fā)明燈盞細(xì)辛凍干粉針制劑的賦形劑為甘露醇、葡萄糖、乳糖、右旋糖酐、葡聚糖中的一種或兩種。
二、優(yōu)選試驗(yàn) 在本發(fā)明的制備工藝中，大孔吸附樹(shù)脂的種類(lèi)和操作條件對(duì)產(chǎn)品質(zhì)量非常重要，因此，我們對(duì)大孔吸附樹(shù)脂進(jìn)行了篩選，以確保燈盞細(xì)辛注射制劑的穩(wěn)定性和臨床療效；篩選試驗(yàn)如下 1.樹(shù)脂型號(hào)的優(yōu)選 將樹(shù)脂首先進(jìn)行預(yù)處理，進(jìn)行低溫真空干燥，待用。精確稱(chēng)取一定體積的燈盞細(xì)辛提取溶液，往溶液中加入定量的樹(shù)脂，充分?jǐn)嚢?，濾去樹(shù)脂得到濾液，濾液定容、稀釋?zhuān)凑兆贤夥止夤舛确y(cè)定燈盞細(xì)辛有效部位的含量。已吸附飽和的樹(shù)脂，加入丙酮，充分解吸。
按照下面的公式計(jì)算 吸附率E＝(Co-Cr)/Co×100％ 樹(shù)脂在室溫下的吸附量Q＝(Co-Cr)×V/W 洗脫率＝(c1×v1)/{(Co-Cr)·V}×100％ 公式中Q為吸附量(mg/g)，Co為起始濃度(mg/mL)，Cr為剩余濃度(mg/mL)，V為吸附溶液體積(mL)，C1為洗脫濃度(mg/mL)，v1為洗脫液的體積，W為樹(shù)脂重量(g)；結(jié)果見(jiàn)表1。
表1不同樹(shù)脂對(duì)燈盞細(xì)辛有效部位的吸附性能的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明Hp-20、LD605相對(duì)D101比吸附值大，能負(fù)載成分多，SP207由于比表面積大，孔徑小，對(duì)成分吸附力強(qiáng)，相比來(lái)講，HP-20和LD605比較容易解吸附，所用洗脫劑量少，從節(jié)約角度看，選用HP-20和LD605大孔樹(shù)脂。
從試驗(yàn)結(jié)果可見(jiàn)HP-20和LD605對(duì)燈盞細(xì)辛有效部位的富集效果要優(yōu)于其余二者，故選用HP-20和LD605為純化樹(shù)脂。
2.上樣濃度的優(yōu)選 藥液的濃度過(guò)大、粘度過(guò)稠都不利于大孔樹(shù)脂的充分吸附，藥液的濃度太低，會(huì)影響生產(chǎn)效率。取不同濃度的藥液，選用LD605作靜態(tài)吸附試驗(yàn)；結(jié)果見(jiàn)表2。表2不同上樣濃度對(duì)燈盞細(xì)辛有效部位的吸附性能的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明隨著藥液濃度的增加，樹(shù)脂的吸附不易達(dá)到飽和，上樣藥液濃度達(dá)到2g/ml后，樹(shù)脂的吸附能力下降，為了保證產(chǎn)量，并節(jié)約能源，故藥液的上樣濃度優(yōu)選范圍為0.5-2g/ml。
3.最佳上柱量的優(yōu)選 分別吸取燈盞細(xì)辛有效部位(2g/ml，生藥)5ml、10ml、15ml、20ml、25ml上LD605型大孔樹(shù)脂柱(R15×H90mm樹(shù)脂干重50g)，過(guò)柱的流出液重復(fù)吸附三次，且靜置30min，依次用去離子水、60％的乙醇各100ml梯度洗脫，收集60％乙醇洗脫液，按測(cè)定方法，測(cè)定燈盞細(xì)辛有效部位的量；結(jié)果見(jiàn)表3。 表3不同上柱量對(duì)燈盞細(xì)辛有效部位的吸附性能的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明5ml、10ml、15ml、20ml、25ml通過(guò)大孔樹(shù)脂吸附柱后，60％乙醇洗脫液中燈盞細(xì)辛有效部位總量無(wú)明顯變化，而5ml燈盞細(xì)辛有效部位總量與10ml成比例關(guān)系，這說(shuō)明，10ml為飽和的上柱量，因此10ml為最佳的上柱量。我們計(jì)算出大孔吸附樹(shù)脂柱色譜的理論上樣量為2kg(燈盞細(xì)辛藥材)/kg(樹(shù)脂干重)。為了使樹(shù)脂能達(dá)到良好的分離效果，考慮到燈盞細(xì)辛當(dāng)中含有的其它成分可能會(huì)影響大孔吸附樹(shù)脂的吸附量，我們最終確定的上樣量是1.0-2.0kg(燈盞細(xì)辛原藥材)/kg(樹(shù)脂干重)。
4.洗脫劑濃度的優(yōu)選 洗脫劑的選擇是色譜技術(shù)中實(shí)現(xiàn)有效分離的關(guān)鍵，大孔樹(shù)脂也不例外。大孔吸附樹(shù)脂柱色譜洗脫常用的溶劑系統(tǒng)有不同濃度的甲醇/水、乙醇/水或丙酮/水等，從安全性和生產(chǎn)成本等方面綜合考慮，我們選擇了乙醇/水，并著重考察了洗脫劑的濃度。樹(shù)脂柱在上樣后首先以去離子水沖洗，除去無(wú)機(jī)鹽、雜蛋白以及多糖等極性較大的不保留成分，水洗至洗脫液顏色變淺，洗脫液揮去溶媒后殘余物顯著減少，一般需要兩個(gè)柱床體積的去離子水沖洗；然后以一定濃度的乙醇溶液洗脫，由于咖啡酰類(lèi)化合物的極性較黃酮苷類(lèi)成分低，所以我們?cè)诳疾煜疵撊苊降臐舛葧r(shí)選擇以能將燈盞乙素大部份洗脫，而咖啡酰類(lèi)成分未大量洗脫的濃度；進(jìn)一步考察能將大部分咖啡酰類(lèi)成分洗下的濃度。
試驗(yàn)方法如下往玻璃層析柱(柱內(nèi)徑5mm；柱長(zhǎng)70cm)中裝入200g(濕重)預(yù)處理完畢的LD605型大孔樹(shù)脂柱(以去離子水混懸后注入柱中)，然后加入相當(dāng)于300g燈盞細(xì)辛藥材的乙醇提取物，以去離子水開(kāi)始洗脫，在洗脫約三個(gè)柱床體積(約900mL)后，水洗脫液顏色變淺，此時(shí)收集200mL洗脫液，減壓揮干后基本無(wú)殘余物，停止水洗脫；改用不同濃度的乙醇溶液洗脫，依次以0％、10％、20％、30％、40％、50％、60％、70％、80％的乙醇沖洗，每個(gè)濃度下洗脫600mL，分別收集后減壓揮干，HPLC檢查每段洗脫物的組成情況；結(jié)果見(jiàn)表4。
表4不同濃度洗脫液洗脫下各類(lèi)成分的組成 +表示檢出目標(biāo)成分；-表示未檢出目標(biāo)成分 用十八烷基硅烷鍵合硅硅膠為填充劑；乙腈-0.2％磷酸(22∶68)為流動(dòng)相；流速為1ml/min；柱溫40℃；VWD紫外檢測(cè)器，檢測(cè)波長(zhǎng)為335nm。。從上表可以看出，30％的乙醇液已基本上可以將燈盞乙素洗脫，60％的乙醇液已基本上可以將咖啡酰類(lèi)成分洗脫，因此我們最終選擇10-30％和40-60％的乙醇作為大孔吸附樹(shù)脂柱色譜的解吸附溶媒。
5.收集洗脫液量的優(yōu)選 考察方法與洗脫劑濃度的考察相似，往玻璃層析柱(柱內(nèi)徑60mm；柱長(zhǎng)100cm)中裝入1kg預(yù)處理完畢的LD605型大孔樹(shù)脂，然后加入相當(dāng)于1.5kg燈盞細(xì)辛藥材的燈盞細(xì)辛乙醇提取物，以去離子水開(kāi)始洗脫，在洗脫約三個(gè)柱床體積后，改用60-70％的乙醇洗脫，分別依次收集第1倍、第2倍和第3倍柱床體積的洗脫液，減壓回收，TLC檢測(cè)每段洗脫物中的成分的組成情況；結(jié)果見(jiàn)表5。 表5不同洗脫段下各類(lèi)成分的組成 +表示檢出目標(biāo)成分；-表示未檢出目標(biāo)成分 試驗(yàn)結(jié)果表明第3-5倍柱床體積的洗脫液已基本上將咖啡酰類(lèi)物質(zhì)洗脫下，而且合并3-5段洗脫液，計(jì)算含量后得到的回收率已大于90％，因此我們最終確立大孔吸附樹(shù)脂柱色譜的解吸附溶媒量為3-5倍柱床體積。
6.調(diào)酸過(guò)程相關(guān)參數(shù)的優(yōu)選 結(jié)合燈盞乙素在酸性條件下易析出的特性，本研究選用濃鹽酸調(diào)PH值。主要考察以下幾個(gè)參數(shù)pH值、靜置時(shí)間、藥液的密度。
(1)pH值的優(yōu)選 調(diào)pH值前測(cè)樣品溶液的pH值為3.8-4.2，為了使溶液中燈盞乙素充分的析出，對(duì)pH值進(jìn)行優(yōu)選試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表6。 表6不同pH值對(duì)燈盞乙素提取率的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明在pH值在1.0-2.0之間時(shí)，燈盞乙素提取率最高，故pH值優(yōu)選范圍為1.0-2.0。
(2)靜置時(shí)間的優(yōu)選 將藥液調(diào)酸后，觀察上清液的澄清度，結(jié)果見(jiàn)表7。
表7靜置時(shí)間對(duì)藥液澄清度的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明在藥液靜置15-30h的時(shí)候，澄明度最好，故將藥液調(diào)酸后的靜置時(shí)間定為15-30h。
(3)藥液密度的優(yōu)選 藥液太濃，析出的沉淀夾雜的雜質(zhì)多，影響產(chǎn)品析出的純度；藥液太稀，不利于燈盞細(xì)辛有效部位的收率，損失多，因此必須尋找藥液調(diào)酸前的合適濃度，本發(fā)明研究人員對(duì)藥液密度進(jìn)行優(yōu)選試驗(yàn)，結(jié)果見(jiàn)表8。 表8不同藥液濃度對(duì)產(chǎn)品收率的影響 試驗(yàn)結(jié)果表明，藥液的密度定為0.75-1.25g.ml-1時(shí)產(chǎn)品收率最高。
在本發(fā)明燈盞細(xì)辛有效部位的制備過(guò)程中，大孔吸附樹(shù)脂為現(xiàn)有大孔吸附樹(shù)脂，優(yōu)選HP-20型和LD-605型大孔吸附樹(shù)脂； 在本發(fā)明燈盞細(xì)辛有效部位的優(yōu)選試驗(yàn)中，大孔吸附樹(shù)脂柱藥液的上樣濃度優(yōu)選范圍為0.5-2g生藥/ml； 在本發(fā)明燈盞細(xì)辛有效部位的優(yōu)選試驗(yàn)中，大孔吸附樹(shù)脂柱的上樣量是1.0-2.0kg(燈盞細(xì)辛原藥材)/kg(樹(shù)脂干重)； 在本發(fā)明燈盞細(xì)辛有效部位的優(yōu)選試驗(yàn)中，優(yōu)選10-40％的乙醇溶液富集燈盞乙素；40-70％的乙醇溶液作為解吸附溶媒富集咖啡酰類(lèi)活性成分。收集10-40％的乙醇洗脫液，減壓回收溶劑至無(wú)醇味，用鹽酸調(diào)節(jié)pH值為1.0-2.0，使燈盞乙素充分結(jié)晶析出，通過(guò)重結(jié)晶可以得到較純的燈盞乙素；合并純化的燈盞乙素和40-70％的乙醇洗脫的富含咖啡酰類(lèi)化合物的部分，干燥，既得到本發(fā)明的燈盞細(xì)辛有效部位； 本發(fā)明還提供了一種燈盞細(xì)辛有效部位，該有效部位是用上述制備方法制得，經(jīng)檢測(cè)，該有效部位提取物中燈盞乙素含量42％-50％，優(yōu)選含量為45％以上；該有效部位提取物中總酚性物質(zhì)的含量70％-90％，優(yōu)選含量為80％以上； 本發(fā)明還提供了燈盞細(xì)辛有效部位的含量測(cè)定方法，其中燈盞乙素采用HPLC法測(cè)定，總酚性物質(zhì)采用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定； 本發(fā)明中燈盞乙素的含量采用HPLC法測(cè)定，具體操作步驟為 以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以乙腈-0.2％磷酸溶液(22∶78)為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)334nm。理論板數(shù)按野黃芩苷計(jì)算應(yīng)不低于2500； 對(duì)照品溶液的制備精密稱(chēng)取燈盞乙素對(duì)照品適量置量瓶中，加甲醇溶解并稀釋至刻度，搖勻作為對(duì)照品溶液； 供試品溶液的制備精密稱(chēng)提取物適量置量瓶中，用50％甲醇稀釋至刻度，搖勻，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品與供試品溶液各20μl，注入高效液相色譜儀，測(cè)定，即得； 本發(fā)明中總酚性物質(zhì)采用紫外可見(jiàn)分光光度法測(cè)定，具體操作步驟為 對(duì)照品溶液的制備；精密稱(chēng)取4，5-氧-二咖啡?？鼘幩徇m量置量瓶中，用水稀釋至刻度，搖勻，即得； 供試品溶液的制備精密稱(chēng)取提取物適量置量瓶中，加水至刻度，搖勻，即得。
測(cè)定法分別取對(duì)照品溶液與供試品溶液，照紫外-可見(jiàn)分光光度法(附錄VA)，在332nm處測(cè)定吸光度，計(jì)算，即得； 三、藥理毒理試驗(yàn) 試藥與動(dòng)物燈盞細(xì)辛注射液(市售品)；本發(fā)明燈盞細(xì)辛注射制劑(按本發(fā)明制備工藝制備，由北京聯(lián)合偉華藥業(yè)中藥實(shí)驗(yàn)室提供)；Wistar大鼠，體重180-220g；健康昆明種小鼠，體重20-24g； 1.對(duì)小鼠缺氧耐力的影響實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)方法取健康昆明種小鼠50只，體重20-24g。隨機(jī)分成對(duì)照組，燈盞細(xì)辛注射液組、本發(fā)明燈盞細(xì)辛注射制劑組。每組10只，雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。以人常規(guī)治療劑量折算為小鼠的劑量。折算公式為待測(cè)動(dòng)物試用劑量＝已知?jiǎng)游锝o藥量×待測(cè)動(dòng)物的體表面積比值/已知?jiǎng)游锏捏w表面積比值。對(duì)照組給生理鹽水，1次/天，連續(xù)7d。于末次給藥后1h，將小鼠分別置于體積為150ml磨口瓶中，內(nèi)放15g鈉石灰，密閉觀察其存活時(shí)間；結(jié)果見(jiàn)表9。表9對(duì)小鼠常壓缺氧的影響(X±SD) 注與對(duì)照組比較*P＜0.01；與燈盞細(xì)辛注射制劑組比較#P＜0.05。
實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明注射制劑、燈盞細(xì)辛注射液均能提高小鼠常壓缺氧耐力，平均存活時(shí)間比對(duì)照組顯著延長(zhǎng)；本發(fā)明注射制劑和燈盞細(xì)辛注射液相比，平均存活時(shí)間也有差異。說(shuō)明本發(fā)明注射制劑的作用強(qiáng)于燈盞細(xì)辛注射液。
2.對(duì)小鼠心肌缺氧的保護(hù)作用實(shí)驗(yàn) 實(shí)驗(yàn)方法取健康昆明種小鼠50只，體重20-24g，隨機(jī)分成5組，隨機(jī)分成對(duì)照組，燈盞細(xì)辛注射液組、本發(fā)明制劑組。每組雌雄各半，分籠飼養(yǎng)。以人常規(guī)治療劑量折算為小鼠的劑量。折算公式為待測(cè)動(dòng)物試用劑量＝已知?jiǎng)游锝o藥量×待測(cè)動(dòng)物的體表面積比值/已知?jiǎng)游锏捏w表面積比值。對(duì)照組給生理鹽水。給藥方法1次/天，連續(xù)6天。于末次給藥后1小時(shí)用烏拉坦1.2g/kg腹腔注射麻醉，背部固定，分離氣管，以動(dòng)脈夾夾閉氣管，用心電儀觀察心電，并用秒表記下小鼠夾閉氣管后至心電消失的時(shí)間；結(jié)果見(jiàn)表10。 表10對(duì)小鼠心肌缺氧的影響(X±SD) 注與對(duì)照組比較*P＜0.01；與燈盞細(xì)辛注射液比較#P＜0.05 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明注射制劑、燈盞細(xì)辛注射液均能對(duì)小鼠心肌缺氧起保護(hù)作用，平均存活時(shí)間比對(duì)照組顯著延長(zhǎng)；本發(fā)明注射制劑和燈盞細(xì)辛注射液相比，平均存活時(shí)間也有差異。說(shuō)明本發(fā)明注射制劑的作用強(qiáng)于燈盞細(xì)辛注射液。
3.對(duì)大鼠體內(nèi)血栓形成的影響 取Wistar大鼠50只，體重180-220g，隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為生理鹽水對(duì)照組、燈盞細(xì)辛注射液組、本發(fā)明注射制劑組。以人常規(guī)治療劑量折算為大鼠的劑量。折算公式為待測(cè)動(dòng)物試用劑量＝已知?jiǎng)游锝o藥量×待測(cè)動(dòng)物的體表面積比值/已知?jiǎng)游锏捏w表面積比值。將各組動(dòng)物給藥(生理鹽水組給予等體積的生理鹽水)，每日1次，連續(xù)給藥7天，末次給藥后1小時(shí)，將大鼠用10％水合氯醛，按0.3g/kg體重麻醉后固定，分離左頸總動(dòng)脈，在血栓儀上以2mA電流刺激血管7min后，記錄血栓形成時(shí)間；結(jié)果見(jiàn)表11。
表11對(duì)大鼠體內(nèi)血栓形成的影響(X±SD) 注與對(duì)照組比較*P＜0.01；與燈盞細(xì)辛注射液組比較#P＜0.05 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明注射制劑和燈盞細(xì)辛注射液都能延長(zhǎng)大鼠體內(nèi)血栓的形成；本發(fā)明注射制劑和燈盞細(xì)辛注射液相比，延長(zhǎng)時(shí)間也有差異。說(shuō)明本發(fā)明注射制劑的作用強(qiáng)于燈盞細(xì)辛注射液。
4.抗血小板聚集作用 取Wistar大鼠50只，體重180-220g，隨機(jī)分成5組，每組10只，分別為對(duì)照組、燈盞細(xì)辛注射液組、本發(fā)明注射制劑組。以人常規(guī)治療劑量折算為大鼠的劑量。折算公式為待測(cè)動(dòng)物試用劑量＝已知?jiǎng)游锝o藥量×待測(cè)動(dòng)物的體表面積比值/已知?jiǎng)游锏捏w表面積比值。各組動(dòng)物給藥，每日1次，連續(xù)給藥7天，末次給藥后1小時(shí)，動(dòng)物麻醉后自腹主動(dòng)脈取血，抗凝劑采用3.28％枸櫞酸鈉，與血液以1∶9比例混合。將抗凝全血在20℃條件下1500r·min-1離心5min，獲得富血小板血漿(platelet-richplasma，PRP)。留取定量PRP后，將剩余PRP再次以3000r·min-1離心10min，獲得自身對(duì)照貧血小板血漿(platelet-poorplasma，PPP)。以PPP調(diào)節(jié)PRP濃度，使各PRP濃度相同。將PRP在37℃的恒溫孔中預(yù)熱后，加入ADP(終濃度為3μmol·L-1)引起血小板聚集，記錄最大聚集率；結(jié)果見(jiàn)表12。表12抗血小板聚集作用(X±SD) 注與對(duì)照組比較*P＜0.01；與燈盞細(xì)辛注射液組比較#P＜0.05 實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明注射制劑和燈盞細(xì)辛注射液都能明顯抑制血小板聚集，但是本發(fā)明注射制劑抑制血小板聚集的作用強(qiáng)于燈盞細(xì)辛注射液。
5.血管刺激性考察 取家兔8只，隨機(jī)均分2組，每組4只，分別于左耳把家兔置于固定器中，且頭用兔頭固定儀固定，用酒精將皮膚消毒后，于右側(cè)耳緣靜脈注射燈盞細(xì)辛注射液和本發(fā)明注射制劑，給藥劑量相當(dāng)于生藥2.0g/kg，于另一側(cè)對(duì)應(yīng)部位注射同一體積的生理鹽水作為對(duì)照，每日注射1次，連續(xù)1周，觀察兔耳緣靜脈反應(yīng)，每日觀察注射部位血管有無(wú)發(fā)紅、水腫、周?chē)袩o(wú)滲血，觸摸血管有無(wú)變硬現(xiàn)象，左右耳比較觀察。于末次給藥后24h，將動(dòng)物處死，取下兩耳，進(jìn)行組織切片檢查，切片部位為進(jìn)針部位的向心端，距進(jìn)針部位1-4cm，分1-2.5cm和2.5-4cm兩段取樣。
觀察指標(biāo)及評(píng)分標(biāo)準(zhǔn)觀察方法包括肉眼觀察和顯微鏡下病理觀察。觀察給藥血管及其周?chē)M織的變化，顯微鏡下觀察耳緣靜脈有無(wú)血栓形成、內(nèi)皮損傷及血管周?chē)M織的病理變化情況。對(duì)各項(xiàng)指標(biāo)評(píng)分。①血管變化肉眼觀察無(wú)明顯充血記0分，輕度充血發(fā)紅、紋路清晰記1分，充血發(fā)紅、紋路不清記2分，重度充血、呈紫紅色記3分；顯微鏡觀察血管內(nèi)皮及血管壁完整記0分，有內(nèi)皮損傷記1分，有血栓栓塞記2分，血管破裂記3分。②血管周?chē)M織變化肉眼觀察無(wú)明顯水腫記0分，輕微水腫記1分，明顯水腫記2分，嚴(yán)重水腫記3分；顯微鏡觀察周?chē)M織正常記0分，水腫記1分，出血記2分，有炎癥細(xì)胞浸潤(rùn)記3分。將每組4只家兔各項(xiàng)觀察指標(biāo)得分累加，計(jì)算各組平均得分值，見(jiàn)表13。
表13刺激性試驗(yàn)結(jié)果 由以上實(shí)驗(yàn)結(jié)果可知本發(fā)明注射制劑與燈盞細(xì)辛注射液比較刺激性具有明顯改善。
6.溶血毒性考察 2％紅細(xì)胞混懸液的制備取兔耳緣靜脈取血10-20ml，放入盛有玻璃珠的錐形瓶中，振搖10分鐘，除去纖維蛋白原，使成脫纖血。加10倍量的生理鹽水溶液，搖勻，離心，除去上清液，沉淀的紅細(xì)胞再用生理鹽水溶液洗滌2-3次，至上清液不呈紅色時(shí)為止。將所得的紅細(xì)胞用用生理鹽水配成濃度為2％的混懸液，即得。
試驗(yàn)方法取試管6支，按表中的配比量依次加入2％紅細(xì)胞混懸液和生理鹽水溶液，混勻，于37℃恒溫箱中放置30分鐘，分別加入不同量的藥液(以第6管為空白對(duì)照)，搖勻后，置37℃恒溫箱中，開(kāi)始每隔15分鐘觀察1次，1小時(shí)后，每隔1小時(shí)觀察1次，共觀察2小時(shí)。結(jié)果見(jiàn)表14。
表14溶血實(shí)驗(yàn)結(jié)果 結(jié)果以第3試管為準(zhǔn)，各管均未染有紅色，顯微鏡下觀察未見(jiàn)有紅細(xì)胞破裂，說(shuō)明本品不溶血，安全性好。
7.急性毒性試驗(yàn) 取Wistar大鼠80只，雌雄各半。禁食24h，隨機(jī)分4組，每組20只。濃縮成相同的生藥濃度，各組分別尾靜脈注射藥物，給藥劑量按生藥量折算相當(dāng)于2.0？g生藥/kg，每天給藥3次，連續(xù)7天，觀察小鼠死亡情況，結(jié)果見(jiàn)表15。
表15急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果 急性毒性實(shí)驗(yàn)結(jié)果表明本發(fā)明注射制劑與燈盞細(xì)辛注射液比較安全性更好。
四、制備實(shí)施例 實(shí)施例1 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用6倍量的50％乙醇水溶液回流提取三次，每次1.5h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值6.5，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.0，減壓濃縮至1g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用20％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.0，靜置12h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶3次得精制燈盞乙素；再用40％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入甘露醇，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，制備本成發(fā)明凍干粉針制劑1000支； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶； 實(shí)施例2 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用7倍量的55％乙醇水溶液回流提取三次，每次2h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值6.8，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.5，減壓濃縮至1.5g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用25％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.5，靜置15h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶4次得精制燈盞乙素；再用50％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入葡萄糖，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得制備本成發(fā)明凍干粉針制劑1000支； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶； 實(shí)施例3 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用8倍量的60％乙醇水溶液回流提取三次，每次2.5h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH值7.0，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值6.0，減壓濃縮至2.5g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用30％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至2.0，靜置18h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶5次得精制燈盞乙素；再用50％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入乳糖和右旋糖酐，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，制備成本發(fā)明凍干粉針制劑1000支； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶； 實(shí)施例4 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用6倍量的65％乙醇水溶液回流提取三次，每次3h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用氫氧化鈉調(diào)節(jié)pH值8.0，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值6.0，減壓濃縮至3g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用40％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.8，靜置24h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶3次得精制燈盞乙素；再用55％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，即得制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入葡聚糖，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，制備本成發(fā)明凍干粉針制劑1000支；； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶； 實(shí)施例5 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用7倍量的70％乙醇水溶液回流提取三次，每次1.5h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用碳酸鈉調(diào)節(jié)pH值6.8，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.4，減壓濃縮至2.5g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用30％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.8，靜置30h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶4次得精制燈盞乙素；再用60％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入甘露醇和葡萄糖，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，制備本成發(fā)明凍干粉針制劑1000支；； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶； 實(shí)施例6 (1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備 取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用8倍量的75％乙醇水溶液回流提取三次，每次2h。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用碳酸氫鈉調(diào)節(jié)pH值7.5，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.8，減壓濃縮至2.4g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用38％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.6，靜置20h，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶4次得精制燈盞乙素；再用60％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位； (2)制劑的制備 水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH6.5-7.0，灌裝，滅菌，制備成本發(fā)明水針制劑1000支； 凍干粉針劑的制備取有效部位，加入葡萄糖和乳糖，調(diào)pH6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，制備本成發(fā)明凍干粉針制劑1000支； 輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，制備成本發(fā)明輸液劑500瓶。
權(quán)利要求
1.一種燈盞細(xì)辛注射制劑，其特征在于燈盞細(xì)辛有效部位中總酚性物質(zhì)的含量為70％-90％，其中燈盞乙素的含量為42％-50％；
2.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征包括以下步驟
(1)燈盞細(xì)辛有效部位的制備
取燈盞細(xì)辛的全草，粉碎成粗粉，藥材用6-8倍量的50-80％乙醇水溶液回流提取三次，每次1.5-3小時(shí)。過(guò)濾，棄渣，合并提取液，藥液減壓回收乙醇至無(wú)醇味，回收液用堿液調(diào)節(jié)pH值6.5-8.0，過(guò)陶瓷膜超濾，除去植物性大分子雜質(zhì)；超濾液用鹽酸調(diào)pH值5.0-6.0，減壓濃縮至1-3g/ml，濃縮液上大孔樹(shù)脂層析，先用水洗脫，再用20-40％乙醇洗脫，收集乙醇洗脫液，用濃鹽酸調(diào)pH值至1.0-2.0，靜置12-30小時(shí)，離心，沉淀物用乙醇重結(jié)晶3-5次得精制燈盞乙素；再用40-70％乙醇洗脫大孔吸附樹(shù)脂柱，收集乙醇洗脫液，減壓揮去溶媒，得濃縮液；將濃縮液和燈盞乙素合并，得燈盞細(xì)辛有效部位；
(2)制劑的制備
水針劑的制備取有效部位，加入注射用水，用0.1％的活性碳煮沸15min，趁熱濾過(guò)，濾液繼續(xù)用0.22μm的微孔濾膜濾過(guò)，調(diào)pH值6.5-7.0，灌裝，滅菌，即得；
凍干粉針劑的制備取有效部位，加入凍干賦形劑，調(diào)pH值6.5-7.0，濾過(guò)，濾液加0.1％的活性碳煮沸15min，稍冷，過(guò)濾至澄明，滅菌后分裝，冷凍干燥，壓蓋，即得；
輸液劑的制備取有效部位，加入適量吐溫-80，攪勻、冷藏、濾過(guò)，加注射用水，過(guò)濾，分裝，115℃滅菌30分鐘，包裝，即得；
3.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述陶瓷膜超率的截留分子量為8000千至3萬(wàn)；
4.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述大孔樹(shù)脂為HP-20型和LD605型樹(shù)脂；
5.如權(quán)利要求1所述的燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述的大孔樹(shù)脂上樣濃度0.5-2g/ml；最佳上樣量是1.0-2.0kg(燈盞細(xì)辛原藥材)/kg(樹(shù)脂干重)；
6.如權(quán)利要求1所述的一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述的最終選擇10-30％和40-60％的乙醇作為大孔吸附樹(shù)脂柱色譜的解吸附溶媒；
7.如權(quán)利要求1所述的一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述的最終確立大孔吸附樹(shù)脂柱色譜的解吸附溶媒量為3-5倍柱床體積；
8.如權(quán)利要求1所述的一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述的靜置時(shí)間定為15-30小時(shí)；
9.如權(quán)利要求1所述的一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法，其特征在于所述的藥液的密度定為0.75-1.25g.ml-1；
10.如權(quán)利要求1所述的一種燈盞細(xì)辛注射制劑，其特征在于在制備治療心腦血管疾病藥物中的應(yīng)用；
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種燈盞細(xì)辛注射制劑的制備方法及其應(yīng)用，本發(fā)明的特點(diǎn)是采用陶瓷膜超濾除去植物性大分子雜質(zhì)，并根據(jù)大孔樹(shù)脂吸附性和篩性的原理以及燈盞細(xì)辛中化學(xué)成分理化性質(zhì)的差異性，對(duì)燈盞細(xì)辛中的有效成分黃酮苷燈盞乙素和咖啡酰類(lèi)成分進(jìn)行有效的富集，從而達(dá)到分離、純化的目的。采用該工藝制備方法提取得到的燈盞細(xì)辛有效部位其總酚性物質(zhì)含量為70％－90％，其中燈盞乙素含量為42％－50％。由本發(fā)明所研制的燈盞細(xì)辛注射制劑安全性更好、刺激性小，能顯著提高散寒解表，活血舒筋等功效。本發(fā)明制劑在治療心腦血管缺血性疾病方面療效顯著。
文檔編號(hào)A61P9/00GK1947736SQ200510112608
公開(kāi)日2007年4月18日 申請(qǐng)日期2005年10月11日 優(yōu)先權(quán)日2005年10月11日
發(fā)明者張樹(shù)祥, 闞迎昕 申請(qǐng)人:北京聯(lián)合偉華藥業(yè)有限公司