專利名稱：一種治療胸痹心痛的中藥組合物及其制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法和用途的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及一種中藥組合物及其制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法和用途，特別涉及一種胸痹心痛的中藥組合物及其制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法和用途，屬中藥制藥領(lǐng)域。
背景技術(shù)：
冠心病心絞痛是指由冠狀動(dòng)脈供血不足而導(dǎo)致的以心肌急劇的、暫時(shí)的缺血、缺氧為特征的臨床綜合征，屬于祖國(guó)醫(yī)學(xué)“胸痹” “心痛”范 疇。祖國(guó)醫(yī)學(xué)對(duì)冠心病心絞痛的認(rèn)識(shí)由來(lái)已久，對(duì)此病的記載首見(jiàn)于《內(nèi)經(jīng)》，如《素問(wèn) 標(biāo)本病傳論》“心病先心痛”?！督饏T要略》記載其典型癥狀為“胸痹之病，喘息咳唾，胸背痛，短氣”。大多數(shù)醫(yī)家認(rèn)為本病病機(jī)為本虛標(biāo)實(shí)。本虛主要包括氣、血、陰、陽(yáng)之虛，標(biāo)實(shí)則為瘀血、寒凝、痰濁、氣滯諸證。其病位在心，但與脾、肝、腎關(guān)系密切。張治祥等認(rèn)為腎虛是冠心病發(fā)病的病機(jī)核心。探析其理，冠心病多見(jiàn)于40歲以上的中老年人，說(shuō)明該病的發(fā)生與衰老有關(guān)。而人體的衰老過(guò)程也就是腎精不斷虧虛的過(guò)程，如《素問(wèn) 上古天真論篇》曰“五八，腎氣衰，發(fā)墮齒槁……七八，肝氣衰，筋不能動(dòng)，天癸竭，精少，腎藏衰，形體皆極。AA,則齒發(fā)去?！蹦吡康日J(rèn)為隨著社會(huì)的發(fā)展，人們生活習(xí)慣改變，多進(jìn)膏粱厚味，嗜食油膩醇酒，損傷脾胃，變生痰濁，影響氣機(jī)，使胸陽(yáng)不展而發(fā)為胸痹，因此診治冠心病應(yīng)從沿襲多年的注重瘀血病機(jī)轉(zhuǎn)為“治痰為先”的思路上來(lái)。由于眾多臨床醫(yī)師對(duì)冠心病辨證分型認(rèn)識(shí)有不同見(jiàn)解，且病情相兼出現(xiàn)，相互轉(zhuǎn)化，故在臨床上的具體治法和用藥呈現(xiàn)多變性。目前常用的治法包括以下幾種1活血化瘀；2益氣活血；3理氣化瘀；4活血祛痰痰瘀學(xué)說(shuō)起始于《黃帝內(nèi)經(jīng)》。自張仲景把胸痹心痛的病因病機(jī)歸納為“陽(yáng)微陰弦”，創(chuàng)立了瓜萎薤白白酒湯、瓜萎薤白半夏湯等化痰通陽(yáng)宣痹的方劑，就為后世從痰瘀論治冠心病心絞痛奠定了基礎(chǔ)；5.益氣溫陽(yáng)；6.益氣養(yǎng)陰。綜觀近年來(lái)中醫(yī)藥對(duì)冠心病心絞痛的治療特別是專方、專藥治療有其獨(dú)特優(yōu)勢(shì)，極大地方便了病人長(zhǎng)期用藥。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明目的在于公開(kāi)一種治療胸痹心痛的中藥組合物及其制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法和用途。本發(fā)明目的是通過(guò)如下技術(shù)方案實(shí)現(xiàn)的。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成為瓜萎皮30-145重量份、薤白15-65重量份、葛根55-220重量份、川芎20_85重量份、丹參55-220重量份、赤芍20-85重量份、澤瀉55-220重量份、黃芪50-180重量份、骨碎補(bǔ)10-40重量份、郁金20-85重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮86重量份、薤白40重量份、葛根138重量份、川彎52重量份、丹參138重量份、赤芍52重量份、澤瀉138重量份、黃芪114重量份、骨碎補(bǔ)26重量份、郁金52重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮137重量份、薤白20重量份、葛根216重量份、川彎22重量份、丹參216重量份、赤芍22重量份、澤瀉216重量份、黃芪60重量份、骨碎補(bǔ)39重量份、郁金22重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮35重量份、薤白60重量份、葛根60重量份、川彎82重量份、丹參60重量份、赤芍82重量份、澤瀉60重量份、黃芪168重量份、骨碎補(bǔ)13重量份、郁金82重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為
瓜萎皮117重量份、薤白28重量份、葛根186重量份、川彎32重量份、丹參186重量份、赤芍32重量份、澤瀉186重量份、黃芪80重量份、骨碎補(bǔ)34重量份、郁金32重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮55重量份、薤白52重量份、葛根90重量份、川彎72重量份、丹參90重量份、赤芍72重量份、澤瀉90重量份、黃芪148重量份、骨碎補(bǔ)18重量份、郁金72重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮97重量份、薤白35重量份、葛根156重量份、川彎42重量份、丹參156重量份、赤茍42重量份、澤灣156重量份、黃苗100重量份、骨碎補(bǔ)30重量份、郁金42重量份。本發(fā)明中藥組合物的原料藥組成優(yōu)選為瓜萎皮75重量份、薤白45重量份、葛根120重量份、川彎62重量份、丹參120重量份、赤芍62重量份、澤瀉120重量份、黃芪128重量份、骨碎補(bǔ)22重量份、郁金62重量份。本發(fā)明的原料藥均為中藥藥材，可在市場(chǎng)上購(gòu)得。本發(fā)明中藥組合物加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、丸劑、蜜丸、顆粒劑、蜜煉膏劑、緩釋制劑、控釋制劑、速釋制劑、口服液體制劑或注射制劑。本發(fā)明藥物組合物可按如下方法制備取原料藥，川芎、郁金、澤瀉粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻；赤芍、瓜萎皮、薤白加70%乙醇加熱回流提取1-3次，每次1-2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 1.30 (65°C);葛根和丹參，單包，加乙醇回流提取2-4次，每次O. 5-2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30 (65°C);黃芪、骨碎補(bǔ)及丹參醇提后的藥渣，加水煎煮1-3次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30 (65°C);將三種濃縮液與上述細(xì)粉混合，減壓干燥，粉碎，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、丸劑。本發(fā)明藥物組合物優(yōu)選如下制備方法取原料藥，川芎、郁金、澤瀉粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻；赤芍、瓜萎皮、薤白加70%乙醇加熱回流提取二次，每次I. 5小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30 (65°C);葛根和丹參(單包)，加乙醇回流提取三次，每次I小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30 (65°C);黃芪、骨碎補(bǔ)及丹參醇提后的藥渣，加水煎煮二次，每次I. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為
I.25 I. 30 (65°C)。將三種濃縮液與上述細(xì)粉混合，減壓干燥，粉碎，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、丸劑。
本發(fā)明質(zhì)量檢測(cè)方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中任意一種或幾種鑒別A.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚50_70ml，密塞，浸潰3-5小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材O. 5g，加乙醚10-20ml,同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以7-9 3-1的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加甲醇50_70ml，加熱回流O. 5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2_4次，每次20-40ml，合并正丁醇液，用水10-30ml洗滌，棄去水液，正丁醇液濃縮至1ml，加200目中性氧化鋁2g，置水浴上拌勻，蒸干，裝在預(yù)先填裝好的中性氧化鋁柱(200目，2g，內(nèi)徑20mm)上，用4-6 :6_4的乙酸乙酯-甲醇混合液50_70ml洗脫，收集初洗脫液5 7ml備用， 其余洗脫液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以30-50 4-6 9-11 0. 1-0. 3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C.取鑒別B項(xiàng)下的初洗脫液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以15-25 1的甲苯-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚50_70ml，浸潰
O.5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，棄去濾液，藥渣揮去乙醚，加甲醇50-70ml回流提取O. 5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次用量為15-20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2-4次，每次10-30ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?0-30ml使溶解，放冷，通過(guò)DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑I. 5cm，柱高15cm)，以水30-50ml洗脫，棄去水液，再用40%乙醇30_50ml洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，續(xù)用70%乙醇40-60ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10-15 5-9 1-3三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開(kāi)齊U，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以10-20 70-90 2-4的甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為249nm ;理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml中含葛根素O. Img的對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 4g，加甲醇25ml，稱定重量，超聲處理I小時(shí)，放冷，再稱定重量，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品以日服用劑量為單位含葛根以葛根素(C21H2tlO9)計(jì)，不得少于20. 7mg。
本發(fā)明質(zhì)量檢測(cè)方法優(yōu)選如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的一種或幾種 鑒別A.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚60ml，密塞，浸潰4小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材O. 5g，加乙醚15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ I,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的娃膠G薄層板上，以8 :2的石油醚(60-90°C )-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)；B.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加甲醇60ml，加熱回流I小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗滌，棄去水液，正丁醇液濃縮至Iml，加200目中性氧化鋁2g，置水浴上拌勻，蒸干，裝在預(yù)先填裝好的中性氧化鋁柱(200目，2g，內(nèi)徑20mm)上，用I :1的乙酸乙酯-甲醇混合液60ml洗脫，收集初洗脫液5 7ml備用，其余洗脫液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ I,分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的娃膠G薄層板上，以40 5 10 0. 2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；C.取鑒別B項(xiàng)下的初洗脫液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以19 :1的甲苯-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)；D.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，加乙醚60ml，浸潰I小時(shí)，濾過(guò)，棄去濾液，藥渣揮去乙醚，加甲醇60ml回流提取I小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，依次為20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，放冷，通過(guò)DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱(內(nèi)徑I. 5cm，柱高15cm)，以水40ml洗脫，棄去水液，再用40%乙醇40ml洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，續(xù)用70%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VI B)試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以13 7 :2三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，1050C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰。供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)。含量測(cè)定照高效液相色譜法(中國(guó)藥典2010年版一部附錄VID)測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以15 82 3的甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為249nm ;理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml中含葛根素O. Img的對(duì)照品溶液；供試品溶液的制備取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 4g，加甲醇25ml，稱定重量，超聲處理I小時(shí)，放冷，再稱定重量，加甲醇補(bǔ) 足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得；測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ I，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得；本品以日服用劑量為單位含葛根以葛根素(C21H2tlO9)計(jì)，不得少于20. 7mg。本發(fā)明中藥組合物具有寬胸通陽(yáng)，化痰散結(jié)，活血化瘀的功能。用于痰瘀互結(jié)所致的胸痹心痛，癥見(jiàn)胸悶胸痛，憋氣，舌質(zhì)紫暗，苔白膩；冠心病心絞痛見(jiàn)上述證候者。主要藥效學(xué)試驗(yàn)證明，本發(fā)明中藥組合物能明顯減輕犬心肌缺血程度，隨著給藥時(shí)間延長(zhǎng)，作用愈加明顯，縮小心肌缺血范圍，同時(shí)明顯抑制心肌缺血，心肌梗塞所引起的CPK、LDH活性升高。本發(fā)明中藥組合物能明顯改善犬心臟血液動(dòng)力學(xué)指標(biāo)，增加冠脈流量和降低血管阻力，降低心肌耗氧量。本發(fā)明中藥組合物對(duì)異丙基腎上腺素引起大鼠心肌損傷有改善作用。本發(fā)明中藥組合物能明顯延長(zhǎng)小鼠在常壓缺氧下生存時(shí)間，同時(shí)能對(duì)抗大鼠血栓形成，抑制體外血小板聚集，降低高血脂家兔的血清總膽固醇含量和明顯減少動(dòng)脈粥樣斑塊的形成。上述結(jié)果說(shuō)明，本發(fā)明中藥組合物能明顯改善實(shí)驗(yàn)動(dòng)物的心肌缺血，心肌血液動(dòng)力學(xué)、血脂變化、這為在臨床上治療胸痹心痛(冠心病心絞痛)提供了藥理學(xué)基礎(chǔ)。下述實(shí)驗(yàn)例和實(shí)施例用于進(jìn)一步說(shuō)明但不限于本發(fā)明。實(shí)驗(yàn)例I.本發(fā)明中藥組合物制劑對(duì)麻醉犬心肌缺血、心肌梗塞及相關(guān)血液生化指標(biāo)的影響一、試驗(yàn)材料I.實(shí)驗(yàn)動(dòng)物健康成年犬20只，雌雄兼用，體重12. 39 ± I. 97kg,由北京市實(shí)驗(yàn)動(dòng)物養(yǎng)殖調(diào)劑中心提供，合格證號(hào)京動(dòng)管犬字(96)第030號(hào)。2.實(shí)驗(yàn)藥物本發(fā)明中藥組合物片劑(藥品名稱丹萎片)按實(shí)施例I方法制備，硫氮產(chǎn)丨酮片30mg/片，O. 9%氯化鈉注射液；EDTAK2。實(shí)驗(yàn)共分為四組(1)空白對(duì)照組，生理鹽水3ml/kg，n=5; (2)丹萎片2. 5g生藥/kg劑量組，n=5; (3)丹萎片5g生藥/kg劑量組，n=5; (4)陽(yáng)性對(duì)照藥組,硫氮■酮片，5mg/kg, n=5o上述試驗(yàn)藥物，均在實(shí)驗(yàn)前用生理鹽水配制成等體積(3ml/kg)，經(jīng)十二指腸給藥。二、試驗(yàn)方法
動(dòng)物經(jīng)戊巴比妥鈉(30mg/kg)靜脈麻醉，氣管插管，連接SC-3型電動(dòng)呼吸機(jī)；左側(cè)第四肋間開(kāi)胸，暴露心臟，剪開(kāi)心包，做心包床；分離冠狀動(dòng)脈左前降支中段，穿線以備結(jié)扎，造成成急性實(shí)驗(yàn)心肌缺血模型；縫置多點(diǎn)固定式心外膜電極，連接RM-6100型多道生理記錄儀，描記心外膜電圖。結(jié)扎冠脈15分鐘，進(jìn)行記錄，作為給藥前對(duì)照值，經(jīng)十二指腸給予實(shí)驗(yàn)藥物或生理鹽水，于藥后15、30、45、60、90、120、180分鐘記錄30個(gè)標(biāo)測(cè)點(diǎn)心外膜電訊圖，以S-T段升高大于2mv為判斷標(biāo)準(zhǔn)，計(jì)算心肌缺血程度(S-T段升高總mv數(shù)Σ -STXS心肌缺血范圍(S-T段升高總點(diǎn)數(shù)N-ST)。經(jīng)頸外靜脈插管至冠狀靜脈竇，于冠脈結(jié)扎15分鐘(藥前)、藥后30、60、90、120、180分鐘抽血，以SECOMAMS。500P生化分析儀(法國(guó)產(chǎn))測(cè)定冠狀脈結(jié)扎15分鐘(藥前)、藥后30、60、90、120、180分鐘時(shí)血清肌酸磷酸激酶(CPK)、乳酸脫氫酶(LDH)含量。藥后180分鐘記錄完畢，立即取下心臟，生理鹽水沖洗，稱量全心重，在心臟結(jié)扎線以下，平行于冠狀溝均勻地將心室部分橫斷切成5片，然后，置于硝基四氮唑蘭(N-BT)染液中，常溫染色15分鐘，用落點(diǎn)求積法(36點(diǎn)/cm2)測(cè)量每片心肌雙側(cè)的梗塞區(qū)(N-BT非染色區(qū))與非梗塞區(qū)(N-BT染色區(qū))，計(jì)算每片心肌的總面積，心室總面積和梗塞區(qū)總面積，計(jì)算梗塞區(qū)占心室及占全心臟面積的百分比?！?shí)驗(yàn)結(jié)果進(jìn)行統(tǒng)計(jì)學(xué)處理，以t檢驗(yàn)判斷共顯著性。三、試驗(yàn)結(jié)果(一)對(duì)犬心肌缺血(心外膜電圖標(biāo)測(cè))的影響。I.對(duì)犬心肌缺血程度(Σ -ST)的影響(見(jiàn)表I)結(jié)果見(jiàn)表I。經(jīng)十二脂腸給藥，丹萎片2. 5g生藥/kg劑量組、5g生藥/kg劑量組均有明顯減輕心肌缺血的程度(Σ -ST)的作用。藥后60分鐘，丹萎片2. 5g生藥/kg、5g生藥/kg兩個(gè)劑量組(Σ -ST)明顯下降，與藥前和對(duì)照組比較均有顯著差異(均P Z O. 05)。隨給藥時(shí)間的延長(zhǎng)，作用愈加顯著，藥后180分鐘大、小兩個(gè)劑量組Σ -ST分別由藥前304. 40±24· 74mv、297. 60±20· 38mv 降至 192. 80± 16. 36mv、161. 20±24· 77mv,下降了36. 42 ±6. 31%、45. 71 + 8. 50%。與藥前及對(duì)照組比較均有非常顯著差異(均P Z O. 001)。陽(yáng)性對(duì)照藥硫氮圖酮亦有相同作用。2.對(duì)犬心肌缺血范圍(N-ST)的影響(見(jiàn)表2)結(jié)果見(jiàn)表2。對(duì)照組給入生理鹽水后，心肌缺血范圍(N-ST)無(wú)明顯改變，硫氮菌|酮及丹萎片大劑量組有明顯減小心肌缺血范圍(N-ST)的作用，藥后180分鐘，丹萎片5g生藥/kg劑量組(N-ST)由藥前30. 00±0. 00個(gè)示測(cè)點(diǎn)，降至27. 20±1. 92個(gè)標(biāo)測(cè)點(diǎn)，下降
9.33±6. 41%，與藥前比較(P Z O. 01)及對(duì)照比較(P Z O. 05)均有明顯差異。以上結(jié)果表明，丹萎片對(duì)實(shí)驗(yàn)性急性犬心肌缺血有明顯的改善作用，可顯著減輕心肌缺血程度(Σ -ST)，減小心肌缺血范圍(N-ST)。表I各給藥組對(duì)犬急性心肌缺血程度(Σ ST)影響(心外膜電圖標(biāo)測(cè))< X 土SD)
權(quán)利要求
1.一種治療胸痹心痛的中藥組合物，其特征在于該中藥組合物的原料藥組成為 瓜萎皮30-1 45重量份、薤白15-65重量份、葛根55-220重量份、川芎20-85重量份、丹參55-220重量份、赤芍20-85重量份、澤瀉55-220重量份、黃芪50-180重量份、骨碎補(bǔ)10-40重量份、郁金20-85重量份。
2.如權(quán)利要求I所述的中藥物組合物，其特征在于該中藥組合物的原料藥組成為 瓜萎皮86重量份、薤白40重量份、葛根138重量份、川芎52重量份、丹參138重量份、赤芍52重量份、澤瀉138重量份、黃芪114重量份、骨碎補(bǔ)26重量份、郁金52重量份；或瓜萎皮137重量份、薤白20重量份、葛根216重量份、川芎22重量份、丹參216重量份、赤芍22重量份、澤瀉216重量份、黃芪60重量份、骨碎補(bǔ)39重量份、郁金22重量份；或瓜萎皮35重量份、薤白60重量份、葛根60重量份、川芎82重量份、丹參60重量份、赤芍82重量份、澤瀉60重量份、黃芪168重量份、骨碎補(bǔ)13重量份、郁金82重量份；或瓜萎皮117重量份、薤白28重量份、葛根186重量份、川芎32重量份、丹參186重量份、赤芍32重量份、澤瀉186重量份、黃芪80重量份、骨碎補(bǔ)34重量份、郁金32重量份；或瓜萎皮55重量份、薤白52重量份、葛根90重量份、川芎72重量份、丹參90重量份、赤芍72重量份、澤瀉90重量份、黃芪148重量份、骨碎補(bǔ)18重量份、郁金72重量份；或瓜萎皮97重量份、薤白35重量份、葛根156重量份、川芎42重量份、丹參156重量份、赤芍42重量份、澤瀉156重量份、黃芪100重量份、骨碎補(bǔ)30重量份、郁金42重量份；或瓜萎皮75重量份、薤白45重量份、葛根120重量份、川芎62重量份、丹參120重量份、赤芍62重量份、澤瀉120重量份、黃芪128重量份、骨碎補(bǔ)22重量份、郁金62重量份。
3.如權(quán)利要求I或2中藥組合物，其特征在于取原料藥，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、硬膠囊劑、軟膠囊劑、滴丸、丸劑、蜜丸、顆粒劑、蜜煉膏劑、緩釋制劑、控釋制劑、速釋制劑、口服液體制劑或注射制劑。
4.如權(quán)利要求3所述的中藥組合物的制備方法，其特征于該方法為 取原料藥，川芎、郁金、澤瀉粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻；赤芍、瓜萎皮、薤白加70%乙醇加熱回流提取1-3次，每次1-2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為1.25 1.30，651測(cè)；葛根和丹參，單包，加乙醇回流提取2_4次，每次O. 5_2小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30，65°C測(cè)；黃芪、骨碎補(bǔ)及丹參醇提后的藥渣，加水煎煮1-3次，每次1-2小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30，65°C測(cè)；將三種濃縮液與上述細(xì)粉混合，減壓干燥，粉碎，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、丸劑。
5.如權(quán)利要求4所述的中藥組合物的制備方法，其特征于該方法為 取原料藥，川芎、郁金、澤瀉粉碎成細(xì)粉，過(guò)篩，混勻；赤芍、瓜萎皮、薤白加70%乙醇加熱回流提取二次，每次I. 5小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30，65°C測(cè)；葛根和丹參，單包，加乙醇回流提取三次，每次I小時(shí)，合并提取液，濾過(guò)，濾液減壓回收乙醇，濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30，65°C測(cè)；黃芪、骨碎補(bǔ)及丹參醇提后的藥渣，加水煎煮二次，每次I. 5小時(shí)，合并煎液，濾過(guò)，濾液減壓濃縮至相對(duì)密度為I. 25 I. 30，65°C測(cè)；將三種濃縮液與上述細(xì)粉混合，減壓干燥，粉碎，加入常規(guī)輔料，按照常規(guī)工藝，制成散劑、片劑、顆粒劑、硬膠囊劑、丸劑。
6.如權(quán)利要求I或2所述的中藥組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的任意一種或幾種 鑒別
A.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚50-70ml，密塞，浸潰3_5小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材O. 5g，加乙醚10-20ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素 鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以7-9 3-1的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； B.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加甲醇50-70ml，加熱回流O.5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取2_4次，每次20-40ml，合并正丁醇液，用水10-30ml洗滌，棄去水液，正丁醇液濃縮至1ml，加200目中性氧化鋁2g，置水浴上拌勻，蒸干，裝在預(yù)先填裝好的中性氧化鋁柱上，用4-6 6-4的乙酸乙酯-甲醇混合液50-70ml洗脫，收集初洗脫液5 7ml備用，其余洗脫液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以30-50 4-6 9-11 0. 1-0. 3的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； C.取鑒別B項(xiàng)下的初洗脫液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各 ο μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的娃膠G薄層板上，以15-25 1的甲苯-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； D.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚50-70ml，浸潰O.5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，棄去濾液，藥渣揮去乙醚，加甲醇50-70ml回流提取O. 5-1. 5小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0-40ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3-5次，每次用量為15_20ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌2-4次，每次10-30ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?0-30ml使溶解，放冷，通過(guò)DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱，以水30_50ml洗脫，棄去水液，再用40%乙醇30-50ml洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，續(xù)用70%乙醇40_60ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以10-15 5-9 1-3三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定； 色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以10-20 70-90 2-4的甲醇 -水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為249nm ;理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于.2000 ； 對(duì)照品溶液的制備取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml中含葛根素O. Img的對(duì)照品溶液； 供試品溶液的制備取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 4g，加甲醇25ml，稱定重量，超聲處理I小時(shí)，放冷，再稱定重量，加甲醇補(bǔ)足減失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ 1，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得; 本品以日服用劑量為單位含葛根以葛根素C21H2tlO9計(jì)，不得少于20. 7mg。
7.如權(quán)利要求6所述的中藥組合物的質(zhì)量檢測(cè)方法，其特征在于該方法包括如下鑒別和/或含量測(cè)定方法中的任意一種或幾種 鑒別
A.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加乙醚60ml，密塞，浸潰4小時(shí)，濾過(guò)，濾液濃縮至2ml，作為供試品溶液；另取川芎對(duì)照藥材O. 5g，加乙醚15ml，同法制成對(duì)照藥材溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以8 :2的60-90°C石油醚-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，置365nm紫外光燈下檢視；供試品色譜中，在與對(duì)照藥材色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的熒光斑點(diǎn)； B.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，研細(xì)，加甲醇60ml，加熱回流I小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取3次，每次30ml，合并正丁醇液，用水20ml洗滌，棄去水液,正丁醇液濃縮至1ml，加200目中性氧化鋁2g,置水浴上拌勻，蒸干，裝在預(yù)先填裝好的中性氧化鋁柱上，用I :1的乙酸乙酯-甲醇混合液60ml洗脫，收集初洗脫液5 7ml備用，其余洗脫液蒸干，殘?jiān)右掖?ml使溶解，作為供試品溶液；另取芍藥苷對(duì)照品，加乙醇制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各5 10 μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以40 5 10 0. 2的三氯甲烷-乙酸乙酯-甲醇-甲酸為展開(kāi)劑,展開(kāi),取出，晾干,噴以10%硫酸乙醇溶液，在105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； C.取鑒別B項(xiàng)下的初洗脫液濃縮至1ml，作為供試品溶液；另取丹參酮IIA對(duì)照品，加乙酸乙酯制成每Iml含Img的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以19 1的甲苯-乙酸乙酯為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； D.取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，加乙醚60ml，浸潰I小時(shí)，濾過(guò)，棄去濾液，藥渣揮去乙醚，加甲醇60ml回流提取I小時(shí)，濾過(guò)，濾液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，用水飽和的正丁醇振搖提取4次，依次為20ml、20ml、15ml、15ml，合并正丁醇液，用氨試液洗滌3次，每次20ml，棄去氨液，正丁醇液蒸干，殘?jiān)铀?0ml使溶解，放冷，通過(guò)DlOl型大孔吸附樹(shù)脂柱，以水40ml洗脫，棄去水液，再用40%乙醇40ml洗脫，棄去40%乙醇洗脫液，續(xù)用70%乙醇50ml洗脫，收集洗脫液，蒸干，殘?jiān)蛹状糏ml使溶解，作為供試品溶液；另取黃芪甲苷對(duì)照品，加甲醇制成每Iml含O. 5mg的溶液，作為對(duì)照品溶液；照薄層色譜法試驗(yàn)，吸取上述兩種溶液各10μ 1，分別點(diǎn)于同一以羧甲基纖維素鈉為黏合劑的硅膠G薄層板上，以13 7 :2三氯甲烷-甲醇-水的下層溶液為展開(kāi)劑，展開(kāi)，取出，晾干，噴以10%硫酸乙醇溶液，105°C加熱至斑點(diǎn)顯色清晰；供試品色譜中，在與對(duì)照品色譜相應(yīng)的位置上，顯相同顏色的斑點(diǎn)； 含量測(cè)定照高效液相色譜法測(cè)定；色譜條件與系統(tǒng)適用性試驗(yàn)以十八烷基硅烷鍵合硅膠為填充劑；以15 82 3的甲醇-水-冰醋酸為流動(dòng)相；檢測(cè)波長(zhǎng)為249nm ;理論板數(shù)按葛根素峰計(jì)算應(yīng)不低于2000 ；對(duì)照品溶液的制備取葛根素對(duì)照品，加甲醇制成每Iml中含葛根素O. Img的對(duì)照品溶液； 供試品溶液的制備取本發(fā)明中藥組合物制劑日服用劑量的4/3，精密稱定，研細(xì)，精密稱取約O. 4g，加甲醇25ml，稱定重量，超聲處理I小時(shí)，放冷，再稱定重量，加甲醇補(bǔ)足減 失的重量，搖勻，濾過(guò)，取續(xù)濾液，即得； 測(cè)定法分別精密吸取對(duì)照品溶液與供試品溶液各10 μ I，注入液相色譜儀，測(cè)定，即得; 本品以日服用劑量為單位含葛根以葛根素C21H2tlO9計(jì)，不得少于20. 7mg。
8.如權(quán)利要求I或2所述的中藥組合物在制備治療胸痹心痛的藥物中的應(yīng)用。
9.如權(quán)利要求8所述的應(yīng)用，其特征在于所述胸痹心痛是指冠心病心絞痛。
全文摘要
本發(fā)明公開(kāi)了一種治療胸痹心痛的中藥組合物及其制備方法、質(zhì)量檢測(cè)方法和用途，其原料藥組成為瓜蔞皮30-145重量份、薤白15-65重量份、葛根55-220重量份、川芎20-85重量份、丹參55-220重量份、赤芍20-85重量份、澤瀉55-220重量份、黃芪50-180重量份、骨碎補(bǔ)10-40重量份、郁金20-85重量份。本品以日服用劑量為單位含葛根以葛根素(C21H20O9)計(jì)，不得少于20.7mg。本發(fā)明中藥組合物具有寬胸通陽(yáng)，化痰散結(jié)，活血化瘀的功能。用于痰瘀互結(jié)所致的胸痹心痛，癥見(jiàn)胸悶胸痛，憋氣，舌質(zhì)紫暗，苔白膩；冠心病心絞痛見(jiàn)上述證候者。
文檔編號(hào)A61K36/9066GK102908583SQ20121040142
公開(kāi)日2013年2月6日 申請(qǐng)日期2012年10月19日 優(yōu)先權(quán)日2012年10月19日
發(fā)明者宋治國(guó) 申請(qǐng)人:吉林康乃爾藥業(yè)有限公司