專利名稱：長春西汀聚合物膠束制劑及其制備方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及藥物制備技術(shù)領(lǐng)域，具體涉及一種長春西汀聚合物膠束及其制備方法。
背景技術(shù)：
長春西汀(vinpocetine)是從夾竹桃科小蔓長春花(Vinca minor L.)中提取的吲哚類生物堿長春胺(vincamine)的衍生物，是20世紀(jì)70年代匈牙利Gedeon Richter公司開發(fā)的腦循環(huán)代謝改善劑，該藥作為改善腦循環(huán)的首選藥物，主要用于治療腦梗塞、腦出血后遺癥及腦動脈硬化癥等多種類型的循環(huán)障礙性腦血管疾病。但人體內(nèi)肝臟細(xì)胞對長春西汀具有極強的代謝作用，存在嚴(yán)重的肝臟首過效應(yīng)， 藥物主要代謝產(chǎn)物為阿樸長春胺酸，由腎臟排泄，其藥理作用與原形藥相似，但藥效較低； 而且長春西汀在體內(nèi)分布廣泛，自血漿消除較快，雖然易透過血腦屏障但其在腦部的生物利用率很低，腦脊液中濃度為血濃度的1/30 ；同時由于長春西汀在水中溶解度極低，所以無論是靜脈注射還是口服，動物及人體實驗都顯示其在腦部的生物利用度最高只是3. 7%。聚乙二醇-聚乳酸共聚物根據(jù)分子結(jié)構(gòu)不同可以分為線型共聚物和星型共聚物兩種，線型共聚物根據(jù)分子鏈組成不同，又可分為兩嵌段共聚物、三嵌段共聚物和多嵌段共聚物。以兩端基均為羥基的PEG引發(fā)丙交酯開環(huán)聚合，可以形成三嵌段聚乙二醇-聚乳酸共聚物(PLA-PEG-PLA)，或?qū)汕抖喂簿畚颩PEG-PLA偶聯(lián)，得到分子鏈兩端均為PEG的三嵌段共聚物(PEG-PLA-PEG)?！伴L春西汀兩親性殼聚糖共聚物自組裝膠束的制備”(王宇；喬明曦；沈慶文； 陳大為，中國科學(xué)院上海冶金研究所；材料物理與化學(xué)(專業(yè))博士論文2000年度)公開了制備殼聚糖共聚物自組裝膠束載藥系統(tǒng)，是采用溶劑蒸發(fā)法，制得的載藥膠束平均粒徑為(127. 4 士 8. 0)nm,載藥量為7. 8%,包封率為75. 7%。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于根據(jù)現(xiàn)有技術(shù)制備的長春西汀制劑生物利用度低、水中溶解性差等問題，提供一種新型的長春西汀聚合物膠束制劑。該制劑能增加藥物在水中的溶解度， 利用膠束納米級的粒徑和親水性的外殼使藥物能在血液中長時間循環(huán)并保持穩(wěn)定，促進藥物的吸收。本發(fā)明的另一目的是提供上述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法。本發(fā)明通過以下技術(shù)方案實現(xiàn)上述目的
本發(fā)明通過對載體材料的篩選，最后選擇了經(jīng)FDA批準(zhǔn)的生物可降解的疏水性材料聚乳酸(PLA)與可注射用親水性高分子聚乙二醇(PEG)的嵌段共聚物PEG-PLA (聚乙二醇聚乳酸)為載體材料，采用物理包埋的方法制備疏水性藥物長春西汀載藥膠束，該長春西汀聚合物膠束制劑載藥量相對較高，粒徑相對較小且分布均勻。一種長春西汀聚合物膠束制劑，是由PEG-PLA包埋長春西汀形成，長春西汀與PEG-PLA的質(zhì)量比為廣12:20 (其中6 10:20的比例最佳)；PEG-PLA的重均分子量為 7000 45000，其中聚乙二醇的分子量為2000 15000，聚乳酸的分子量為5000 30000。上述長春西汀聚合物膠束制備的膠束粒徑為5(T200nm，載藥量為2 30%，最佳載藥量平均可達20. 35%。上述聚合物膠束制劑可以通過薄膜水化法、溶劑擴散法和透析法等制備，其中薄膜水化法最優(yōu)，本發(fā)明通過對載藥量、包封率、粒徑及其分布為綜合評價指標(biāo)，對薄膜水化法制備膠束的主要影響因素水化溫度、有機溶劑的種類及用量、水化時間、水化轉(zhuǎn)速、水化水用量、投藥量進行了篩選，最終得出以下制備步驟
(1)將長春西汀與PEG-PLA按質(zhì)量比為廣12:20溶于有機溶劑中，配成0.42%g/ m廣0. 64% g/ml的有機溶液；
(2)將有機溶液攪拌混合均勻，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，形成聚合物藥物膜；
(3)加入去離子水使聚合物藥物膜骨架軟化，然后攪拌形成聚合物膠束，-10°C _30°C 驟冷處理；
(4)驟冷處理后的膠束用微孔膜過濾，除去未包裹的長春西汀，將過濾所得膠束溶液中加入凍干保護劑，然后冷凍干燥得到長春西汀聚合物膠束凍干粉。上述制備方法中，步驟(1)所述有機溶劑為本領(lǐng)域常用的有機溶劑，包括乙腈、乙腈-冰乙酸(體積比17:1)、二氯甲烷、丙酮或丙酮-冰乙酸(體積比17:1)，其中使用二氯甲烷能夠達到最佳的效果。有機溶劑為二氯甲烷時，步驟(2)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)條件為30°C減壓旋蒸anirTlOmin，然后升溫至60°C減壓旋蒸30mirT60min，旋蒸轉(zhuǎn)速為50r/mirT90r/min。步驟(3)優(yōu)選加入去離子水量為長春西汀藥物量的0. 3^2倍，能夠達到最佳效果的軟化水用量為長春西汀藥物量的0. 8 1倍；水化時間為0. 5 20h，最佳水化時間為 lTl2h ；水化溫度為3(T90°C，選用75 85°C達到最佳的效果；攪拌轉(zhuǎn)速為50(T2000r/min， 經(jīng)實驗證明最適轉(zhuǎn)速在120(Tl600r/min。步驟(4)所述微孔膜的孔徑優(yōu)選為0. 45 μ m或0. 22 μ m。步驟(4)中，本發(fā)明以重均分子量為100(Tl0000的PEG或Pluronic F68 (簡稱 F68)作為凍干保護劑，所得膠束凍干粉均可復(fù)溶，但前者的保護效果明顯優(yōu)于后者，最佳凍干保護劑為重均分子量為3350的PEG。本發(fā)明采用優(yōu)化后的薄膜水化法制備長春西汀聚合物膠束制劑，通過單因素篩選，得到對膠束制備影響較為顯著的三個因素水化溫度、水化時間和投藥量，并對他們進行正交設(shè)計優(yōu)化實驗，最終得出薄膜水化法制備長春西汀聚合物膠束的最佳工藝，其最佳制備條件為水化溫度80°C，水化時間12h，投藥量為PEG-PLA的40% mg/mg。與現(xiàn)有技術(shù)相比，本發(fā)明具有以下有益效果
將長春西汀制備成膠束制劑，其內(nèi)核可以作為疏水性藥物的容器，提高長春西汀在水中的溶解度，改善藥物的生物利用度，降低毒副作用，外殼可對長春西汀起保護作用，提高長春西汀的穩(wěn)定性。本發(fā)明的長春西汀聚合物膠束制劑大大改善了長春西汀口服吸收差， 生物利用度低的不足。


圖1為本發(fā)明所用藥物長春西汀的IR圖。圖2為本發(fā)明所用材料PEG-PLA的IR圖。圖3為本發(fā)明所用藥物長春西汀膠束的頂圖。圖4為實施例4所得載藥聚合物膠束粒子的動態(tài)光散射法測定膠束粒徑圖。圖5為實施例5所得載藥聚合物膠束粒子的透射電鏡圖。
具體實施例方式以下通過實施例進一步解釋本發(fā)明，但并不因此將本發(fā)明限制在所述是勢力范圍內(nèi)。實施例中如無特殊說明，均為本領(lǐng)域常規(guī)實驗手段和試劑。實施例1薄膜水化法制備載藥聚合物膠束
精密稱取PEG-PLA 20 mg，放入50 mL的干燥圓底燒瓶中，加入5 mg/mL的長春西汀/ 乙腈溶液0.8 mL，補加3 mL乙腈溶解，振搖，使聚合物和藥物在有機溶液中分散均勻。水浴加熱到60 °C，減壓旋蒸45 min，轉(zhuǎn)速為75 r/min，除去有機溶劑。分別于70°C保溫5 min 使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入5 mL同溫度去離子水，于同樣溫度下恒速1900 r/min攪拌2 h水化，冷卻至室溫，在_20°C冰箱中放置驟冷，用0. 22 μ m微孔濾膜過濾掉未包裹的藥物，向過濾所得的膠束溶液中加入凍干保護劑PEG3350(表示重均分子量為3350)，然后冷凍干燥制得長春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束， 其載藥量為7. 42%。實施例2溶劑擴散法制備載藥聚合物膠束
精密稱取20 mg的PEG-PLA與4 mg的長春西汀，共溶于0. 5 mL的乙腈溶液中，于600 r/min磁力攪拌轉(zhuǎn)速下緩慢滴加于5 mL去離子水中，置于通風(fēng)櫥中同速攪拌4 h，除去有機溶劑，放置于冰箱中冷卻，用0. 22 μ m微孔濾膜過濾，除去未包裹的藥物，向過濾所得的膠束溶液中加入凍干保護劑，然后冷凍干燥制得長春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束，其載藥量為6. 43%。實施例3透析法制備載藥聚合物膠束
精密稱量40 mg的PEG-PLA和20 mg的長春西汀溶解于10 mL N, N- 二甲基甲酰胺 (DMF)中，于45 °C的恒溫水浴中溫浴5 min，磁力攪拌使混勻。將溶液轉(zhuǎn)移至截留分子量為 3500的透析袋中，置于2 L去離子水中透析，分別于第2 h，4 h，6 h，8 h，12 h，24 h更換新鮮去離子水。透析完成后，取出透析袋內(nèi)的溶液，以3000 r/min離心10 min，上清液經(jīng)由 0. 22 μ m微孔濾膜過濾，向過濾所得的膠束溶液中加入凍干保護劑F68，然后冷凍干燥制得長春西汀膠束凍干粉。上述膠束制備方法所制得的載藥膠束，其載藥量為2. 58%。實施例4正交試驗一制備載藥聚合物膠束
薄膜水化法制備膠束精密稱取20 mg的PEG-PLA與8 mg的長春西汀，一同放入50 mL 的干燥圓底燒瓶中，加入5 mL的二氯甲烷，攪拌20 min，使聚合物和藥物在有機溶液中分散均勻。水浴加熱到30 °C，減壓旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)8 min，然后升溫度至60 °C，減壓旋蒸52 min，轉(zhuǎn)速一直保持為80r/min，除去有機溶劑。于80 °C保溫5 min使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入7. 5 mL的同溫度去離子水，保鮮膜封口后，于同樣水浴溫度下以1200 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1400 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1600 r/min 的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，之后立即放入冰箱(_20°C)中驟冷，分別用0.45μπι、0.22μπι微孔濾膜過濾掉未包裹的藥物，向過濾所得的膠束溶液中加入凍干保護劑PEG3350，然后冷凍干燥制得長春西汀膠束凍干粉。得到的載藥膠束載藥量為20. 35%。
實施例5正交試驗二制備載藥聚合物膠束
薄膜水化法制備膠束精密稱取20 mg的PEG-PLA與10 mg的長春西汀，一同放入50 mL的干燥圓底燒瓶中，加入5 mL的二氯甲烷，攪拌20 min，使聚合物和藥物在有機溶液中分散均勻。水浴加熱到30 °C，減壓旋蒸8 min，然后升溫度至60 °C，減壓旋蒸52 min，轉(zhuǎn)速一直保持為80r/min，除去有機溶劑。于70°C保溫5 min使固體骨架膜融化，獲得透明的凝膠樣樣品。加入7. 5 mL的同溫度去離子水，保鮮膜封口后，于同樣水浴溫度下以1200 r/ min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1400 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，再以1600 r/min的轉(zhuǎn)速磁力攪拌水化4h，之后立即放入冰箱(_20°C )中驟冷，分別用0. 45 μ m、0. 22 μ m微孔濾膜過濾掉未包裹的藥物，向過濾所得的膠束溶液中加入凍干保護劑PEG3350，然后冷凍干燥制得長春西汀膠束凍干粉。得到的載藥膠束載藥量為15.90%。
權(quán)利要求
1.一種長春西汀聚合物膠束制劑，其特征在于是由PEG-PLA包埋長春西汀形成，長春西汀與PEG-PLA的質(zhì)量比為廣12:20 ；PEG-PLA的重均分子量為7000 45000，其中聚乙二醇的分子量為2000 15000，聚乳酸的分子量為500(Γ30000。
2.根據(jù)權(quán)利要求1所述長春西汀聚合物膠束制劑，其特征在于膠束粒徑為5(T200nm， 載藥量為2 30%。
3.權(quán)利要求1或2所述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟如下(1)將長春西汀與PEG-PLA按質(zhì)量比為廣12:20溶于有機溶劑中，配成0.42%g/ m廣0. 64% g/ml的有機溶液；(2)將有機溶液攪拌混合均勻，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)除去有機溶劑，形成聚合物藥物膜；(3)加入去離子水使聚合物藥物膜骨架水化，然后攪拌形成聚合物膠束，-IO0C^-300C 驟冷處理；(4)驟冷處理后的膠束用微孔膜過濾，除去未包裹的長春西汀，將過濾所得膠束溶液中加入凍干保護劑，然后冷凍干燥得到長春西汀聚合物膠束凍干粉。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(1)所述有機溶劑為乙腈、體積比為17:1的乙腈-冰乙酸、二氯甲烷、丙酮或體積比為17:1的丙酮-冰乙酸。
5.根據(jù)權(quán)利要求3所述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(1)有機溶劑為二氯甲烷時，步驟(2)旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)條件為30°C減壓旋蒸anirTlOmin，然后升溫至 60°C減壓旋蒸30mirT60min，旋轉(zhuǎn)蒸發(fā)轉(zhuǎn)速為50r/mirT90r/min。
6.根據(jù)權(quán)利要求3所述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(3)加入去離子水的量為長春西汀藥物量的0. 3 2倍，水化時間為0. 5 20h，溫度為3(T90°C，攪拌轉(zhuǎn)速為 50(T2000r/min。
7.根據(jù)權(quán)利要求3所述長春西汀聚合物膠束制劑的制備方法，其特征在于步驟(4)所述微孔膜的孔徑為0. 45 μ m或0. 22 μ m。
8.根據(jù)權(quán)利要求3所述方法，其特征在于步驟(4)所述凍干保護劑為重均分子量為 1000^10000 的 PEG 或 F68。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種長春西汀聚合物膠束制劑及其制備方法，屬于藥物制備技術(shù)領(lǐng)域。該長春西汀聚合物膠束制劑是由聚乙二醇聚乳酸包埋長春西汀形成，長春西汀與聚乙二醇聚乳酸的質(zhì)量比為1~12:20；聚乙二醇聚乳酸的重均分子量為7000~45000，其中聚乙二醇的分子量為2000~15000，聚乳酸的分子量為5000~30000。本發(fā)明采用經(jīng)過條件篩選的薄膜水化法制備長春西汀聚合物膠束制劑，對水化溫度、時間及投藥量等都做了最佳限制，得到的產(chǎn)品能明顯改善長春西汀口服吸收差、生物利用度低的不足。
文檔編號A61K47/34GK102327208SQ20111030462
公開日2012年1月25日 申請日期2011年10月10日 優(yōu)先權(quán)日2011年10月10日
發(fā)明者李嘉慧, 李桃, 楊帆, 謝華廷, 黃志軍, 黃淑玲 申請人:廣東藥學(xué)院