專利名稱：地不容總生物堿提取純化工藝的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及生物堿提取技術(shù)領(lǐng)域，特別是一種地不容總生物堿提取純化工藝。
背景技術(shù)：
地不容為防己科植物地不容(SepHaniadelavayi Diels)的塊根。主要分布于云南及四川等地。具有清熱解毒、消痰、截瘧、止痛的功用，主要治療癰疽瘡腫、喉閉、瘧疾、胃痛等癥。生物堿(alkaloid)是指中藥中一類含氮雜環(huán)的有機(jī)物，具有堿性和顯著的生理 活性。目前從植物中分離出的生物堿有五六千種，一些生物堿因其抗癌抗腫瘤及低毒性、低成本成為近年來(lái)研究的熱點(diǎn)?？茖W(xué)高效地從中藥植物中提取、純化其中的生物堿成分是提高中藥質(zhì)量的核心問(wèn)題，因此生物堿提取與純化技術(shù)成為人們關(guān)注的焦點(diǎn)。據(jù)現(xiàn)代研究報(bào)道，地不容總生物堿具有消腫止痛，抗腫瘤的作用，因此對(duì)其制備工藝研究具有重要的現(xiàn)實(shí)意義?，F(xiàn)有提取工藝中并沒有針對(duì)地不容中總生物堿的提取方法。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的在于克服現(xiàn)有技術(shù)的缺點(diǎn)，提供一種地不容總生物堿提取純化工藝。本發(fā)明的目的通過(guò)以下技術(shù)方案來(lái)實(shí)現(xiàn)地不容總生物堿提取純化工藝，它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材0. 5 I倍量的0. I 2%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為I 3h ;a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材3 5倍量的0. I 2%的稀酸溶液浸潰10 15h ；a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為3 7ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無(wú)沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉；a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在30 50°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿；所述的分離包括以下子步驟bl、將大孔樹脂用適量無(wú)水乙醇浸泡20 30h，傾倒掉上層乙醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的乙醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至乙醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無(wú)醇味；b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物堿200/3倍量的
0.5%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH = 5，過(guò)濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為0. 400mg/ml 0. 433mg/ml的地不容樣品液；b3、將地不容樣品液按照I 5ml/min的吸附流速通過(guò)已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附；所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液25/8倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液45/8倍量的百分含量為75%的乙醇溶液以I 5ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。所述的大孔吸附樹酯為D101、AB-8、S-8、D140、D141、HPD 系列、D1300、X_5、Sp825、D312、D20UNKA9大孔吸附樹酯中的任意一種。所述的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸。本發(fā)明具有以下優(yōu)點(diǎn)本發(fā)明一次可提取地不容中所有生物堿，并且提取率高，有利于寶貴的天然資源的綜合利用；本發(fā)明所選用的大孔吸附樹脂對(duì)生物堿的吸附能力強(qiáng)，洗脫容易、方便，洗脫率高，純度高；本發(fā)明工藝步驟少，操作簡(jiǎn)單，方便應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。
下面通過(guò)實(shí)驗(yàn)進(jìn)一步說(shuō)明本發(fā)明的效果I實(shí)驗(yàn)儀器與材料I. I實(shí)驗(yàn)藥材地不容，為防己科植物地不容(SepHnama delavayi Diels)的塊根。I. 2主要儀器及試劑儀器安捷倫1100高效液相色譜儀，卡瑪格全自動(dòng)雙波長(zhǎng)薄層掃描儀，Gilson分析制各多動(dòng)能高效液相色譜儀，日本島津IR-420紅外分光光度計(jì)，美國(guó)貝克曼CS-700全自動(dòng)生化測(cè)定儀，日本島津RF-510映光光度計(jì)，瑞士 PAG-160電子天平，DZF-6021型真空干燥器，燒杯，量筒，膠頭滴管等。材料及試劑地不容藥材，無(wú)水乙醇，95%乙醇，氨水，濃鹽酸，濃硫酸，以上試劑均為AR級(jí)。色譜甲醇，色譜乙腈，蒸餾水。2實(shí)驗(yàn)方法及結(jié)果2. I地不容總生物堿的提取工藝研究2. I. I異粉防己堿含量測(cè)定方法異粉防己堿對(duì)照品液的制備精密稱取在真空干燥器中干燥至恒重的異粉防己堿對(duì)照品2mg,置于IOml容量瓶中，加無(wú)水乙醇定容至刻度，超聲IOmin充無(wú)水乙醇至刻度,搖勻，即得濃度為0. 2mg/ml的異粉防己堿對(duì)照品溶液。2. I. 2標(biāo)準(zhǔn)曲線的測(cè)定精密吸取對(duì)照品溶液2111，4111，6111，8111，10111，12111進(jìn)樣，記錄色譜圖，測(cè)定峰面積，結(jié)果見表I。以峰面積對(duì)進(jìn)樣量進(jìn)行回歸，得回歸方程。色譜柱DikmaDiamOnsil cl8250 X 4. 6mm, 5um柱溫30°C流動(dòng)相乙腈磷酸鹽緩沖液=6 4流速1.Oml/min測(cè)定波長(zhǎng)210nm理論塔板數(shù)不得低于1500表I異粉防己堿對(duì)照品測(cè)定結(jié)果
權(quán)利要求
1.地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟 al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材O. 5 I倍量的O. I 2%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為I 3h ; a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材3 5倍量的.O.1 2%的稀酸溶液浸潰10 15h ； a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為3 7ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無(wú)沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉； a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在.30 50°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿； 所述的分離包括以下子步驟 bl、將大孔樹脂用適量無(wú)水こ醇浸泡20 30h，傾倒掉上層こ醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的こ醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至こ醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無(wú)醇味； b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物堿50 70倍量的.O.1 2%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH=5，過(guò)濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為O. 400mg/ml O. 433mg/ml的地不容樣品液； b3、將地不容樣品液按照I 5ml/min的吸附流速通過(guò)已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附； 所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液2 4倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液5 7倍量的百分含量為75%的こ醇溶液以I 5ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。
2.根據(jù)權(quán)利要求I所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于它包括提取、分離和純化三個(gè)步驟，其中所述的提取包括以下子步驟 al、稱取地不容藥材粗粉，先用重量為地不容藥材O. 5倍量的O. 5%的稀酸溶液進(jìn)行溶脹，溶脹時(shí)間為2h; a2、溶脹完畢后，將藥材逐層放入滲漉筒中，緩慢加入重量為地不容藥材4倍量的O. 5%的稀酸溶液浸潰12h ； a3、浸潰完畢后開始滲漉，滲漉速度為5ml/min，當(dāng)滲漉至滲漉液與碘化鉍鉀試劑反應(yīng)無(wú)沉淀產(chǎn)生時(shí)，停止?jié)B漉； a4、用濃氨水調(diào)滲漉液pH值至9 10，產(chǎn)生大量沉淀，抽濾，得沉淀于真空干燥器中在.40°C下干燥至恒重，得到地不容總生物堿； 所述的分離包括以下子步驟 bl、將大孔樹脂用適量無(wú)水こ醇浸泡24h，傾倒掉上層こ醇，然后濕法裝柱，并不時(shí)用玻璃棒攪拌以除去氣泡，再用樹脂體積的兩至三倍的こ醇與蒸餾水反復(fù)洗脫，以除去樹脂中的殘留物，至こ醇與蒸餾水混合不呈白色渾濁為止，再用大量蒸餾水以同樣流速洗至流出液無(wú)醇味； b2、稱取提取得到的地不容總生物堿，再用重量為地不容總生物200/3倍量的O. 5%的稀酸溶液溶解，然后用濃氨水調(diào)pH=5，過(guò)濾除去不溶物向?yàn)V液中加入蒸餾水，得到異粉防己堿濃度為O. 433mg/ml的地不容樣品液； b3、將地不容樣品液按照3ml/min的吸附流速通過(guò)已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行動(dòng)態(tài)吸附； 所述的純化操作方法為吸附好后依次用體積為地不容樣品液25/8倍量的蒸餾水和體積為地不容樣品液45/8倍量的百分含量為75%的こ醇溶液以3ml/min的流速進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。
3.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于所述的大孔吸附樹酯為 D101、AB-8、S-8、D140、D141、HPD 系列、D1300、X_5、Sp825、D312、D201、NKA9大孔吸附樹酯中的任意ー種。
4.根據(jù)權(quán)利要求I或2所述的地不容總生物堿提取純化工藝，其特征在于所述的稀酸為稀鹽酸或稀硫酸。
全文摘要
本發(fā)明公開了地不容總生物堿提取純化工藝，它包括以下步驟提取，將地不容藥材粗粉用稀酸滲漉，用濃氨水調(diào)滲漉液pH值，得沉淀于真空干燥器中干燥至恒重，得到地不容總生物堿；分離，將地不容總生物堿制成地不容樣品液通過(guò)已處理好的裝有大孔吸附樹酯吸附柱進(jìn)行吸附；純化，吸附好后依次用蒸餾水和75%的乙醇溶液進(jìn)行洗脫，收集洗脫液，將洗脫液蒸干得到干膏。本發(fā)明的有益效果是一次可提取地不容中所有生物堿，并且提取率高，有利于寶貴的天然資源的綜合利用；選用的大孔吸附樹脂對(duì)生物堿的吸附能力強(qiáng)，洗脫容易、方便，洗脫率高，純度高；工藝步驟少，操作簡(jiǎn)單，方便應(yīng)用于實(shí)際生產(chǎn)。
文檔編號(hào)A61P35/00GK102631414SQ20121012457
公開日2012年8月15日 申請(qǐng)日期2012年4月25日 優(yōu)先權(quán)日2012年4月25日
發(fā)明者彭騰 申請(qǐng)人:成都煜泉綠健科技有限公司