專利名稱：牛大力提取物及其在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明屬植物應(yīng)用領(lǐng)域，涉及一種植物活性提取物及其應(yīng)用，具體是一種牛大力提取物及其在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
骨質(zhì)疏松(osteoporosis, 0P)是以骨量減少、骨微觀結(jié)構(gòu)退化、脆性增加和易發(fā)生骨折為特征的一種全身性疾病，多發(fā)于絕經(jīng)后婦女、老人和多種慢性疾病患者。由于骨質(zhì)疏松致殘率較高，極大影響著人們的生活質(zhì)量，給家庭和社會(huì)帶來沉重的經(jīng)濟(jì)負(fù)擔(dān)。隨著人口結(jié)構(gòu)老齡化，骨質(zhì)疏松的問題越來越突出。現(xiàn)代醫(yī)學(xué)認(rèn)為骨質(zhì)疏松的基本病理機(jī)制是在骨代謝過程中骨吸收和骨形成的偶聯(lián)出現(xiàn)了失衡，導(dǎo)致人體內(nèi)的鈣磷代謝不平衡，骨密度逐漸減少而引發(fā)的臨床癥狀。目前臨床上對(duì)于骨質(zhì)疏松的治療尚無理想的方法。中國傳統(tǒng)醫(yī)學(xué)中雖無骨質(zhì)疏松的癥名，但究其臨床表現(xiàn)、發(fā)病機(jī)制應(yīng)歸屬于“骨痹”、“骨痿”的范疇。中醫(yī)理論認(rèn)為，骨質(zhì)疏松的病因病機(jī)主要是腎虧、脾虛和痰瘀阻脈。治則則為補(bǔ)腎壯骨、健脾益氣和活血通絡(luò)。牛大力(Millettia specisoa Champ.),別名豬腳笠、金鐘根、山蓮藕、倒吊金鐘、大力薯，為豆科崖豆藤屬植物，直立或披散亞灌木，高I 2米。根系向下直伸，長I米許。牛大力以根入藥，經(jīng)檢索，目前對(duì)牛大力(牛大力的根)的藥理研究主要是免疫調(diào)節(jié)作用，護(hù)肝作用，抗炎作用，抗氧化、清除自由基作用，抗腫瘤作用，祛痰、鎮(zhèn)咳、平喘作用以及抗凝血作用研究，在治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用尚無報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的目的是提供一種牛大力提取物及其在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明所述的牛大力提取物是將牛大力的根烘干并粉碎成粉末，然后用醇回流提取，過濾提取液，減壓回收盡溶劑，獲得浸膏狀牛大力提取物。一種牛大力極性部位提取物，是取上述牛大力提取物加水稀釋，按順序用石油醚、氯仿和乙酸乙酯依次萃取，將乙酸乙酯萃取液或萃取后剩余的水溶液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末即為牛大力乙酸乙酯部位提取物、牛大力水相部位提取物。本發(fā)明還包括上述牛大力提取物、牛大力乙酸乙酯部位提取物、牛大力水相部位提取物在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。發(fā)明人在藥效試驗(yàn)基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)上述提取物在治療骨質(zhì)疏松上具有良好的藥效，可以用來制備治療骨質(zhì)疏松藥物。所述治療骨質(zhì)疏松藥物是將牛大力提取物與常規(guī)輔料配合，采用現(xiàn)有工藝制得的臨床上允許的內(nèi)用制劑。所述常規(guī)輔料是溶劑、崩解劑、矯味 劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、潤濕劑、
增稠劑、增溶劑或基質(zhì)。所述內(nèi)用制劑是散劑、顆粒劑、片劑、膠囊劑、丸劑、口服液、分散片、噴霧劑、靜脈注射劑、肌肉注射劑、吸入劑或凝膠劑。本發(fā)明還包括上述提取物與祛風(fēng)濕藥、利水滲濕藥、活血化瘀藥、補(bǔ)虛藥中的一種或一種以上的藥物組成復(fù)方藥劑。所述祛風(fēng)濕藥為木瓜、秦艽、五加皮、桑寄生、狗脊等。所述利水滲濕藥為茯苓、澤瀉等。所述活血化瘀藥為川芎、延胡索、牛膝、骨碎補(bǔ)等。所述補(bǔ)虛藥是補(bǔ)陽藥、補(bǔ)陰藥、補(bǔ)氣藥或補(bǔ)血藥。所述補(bǔ)陽藥包括淫羊藿、杜仲、續(xù)斷、鹿角膠、菟絲子、補(bǔ)骨脂、仙茅、肉蓯蓉、紫河車、巴戟天、鹿茸、胡桃肉、葫蘆巴等；所述補(bǔ)陰藥包括麥門冬、黃精、枸杞子、女貞子、旱蓮草、龜板、鱉甲、石斛、玉竹、天門冬等；所述補(bǔ)氣藥包括黃芪、山藥、甘草、白術(shù)、黨參、人參、大棗；所述補(bǔ)血藥包括熟地黃、當(dāng)歸、何首烏、白茍、阿月父等。本發(fā)明所提供的牛大力提取物在治療骨質(zhì)疏松上具有良好的藥效，可以用來開發(fā)治療骨質(zhì)疏松藥物，避免化學(xué)合成藥副作用大的缺點(diǎn)，為骨質(zhì)疏松的治療提供有效途徑，其制備方法簡單，成本低。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合實(shí)施例，對(duì)本發(fā)明的具體實(shí)施方式
作進(jìn)一步詳細(xì)描述。以下實(shí)施例用于說明本發(fā)明，但不用來限制本發(fā)明的范圍。下列實(shí)施例中未注明具體條件的實(shí)驗(yàn)方法，通常按照常規(guī)條件，或按照制造廠商所建議的條件。實(shí)施例一將牛大力的根烘 干并粉碎成粉末，粉末用95%甲醇回流提取3次，合并提取液，過濾，減壓回收盡甲醇獲得浸膏狀甲醇粗提物，甲醇粗提物加水稀釋，然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，分別將萃取液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末分別為牛大力石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末為牛大力水相部位提取物。實(shí)施例二將牛大力的根烘干并粉碎成粉末，粉末用95%乙醇回流提取4次，合并提取液，過濾，減壓回收盡乙醇獲得浸膏狀乙醇粗提物，乙醇粗提物加水稀釋，然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，分別將萃取液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末分別為牛大力石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末為牛大力水相部位提取物。實(shí)施例三將牛大力的根烘干并粉碎成粉末，粉末用75%乙醇回流提取6次，合并提取液，過濾，減壓回收盡乙醇獲得浸膏狀甲醇粗提物，乙醇粗提物加水稀釋，然后依次用石油醚、氯仿、乙酸乙酯萃取，分別將萃取液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末分別為牛大力石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物。萃取后剩余的水溶液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末為牛大力水相部位提取物。實(shí)驗(yàn)一、體外試驗(yàn)
將實(shí)施例獲得的提取物(醇粗提物、石油醚部位提取物、氯仿部位提取物、乙酸乙酯部位提取物、水相部位提取物)分別用PBS (磷酸鹽緩沖液)配制成10mg/mL儲(chǔ)備液，臨用前稀釋成 1000Pg/mL, 100Pg/mL。實(shí)驗(yàn)步驟取原代培養(yǎng)的鼠成骨細(xì)胞(OB)以2X IO4個(gè)/mL接種于96孔板，每孔體積90μ ，在CO2培養(yǎng)箱中培養(yǎng)24h。待細(xì)胞貼壁后，加入提取物的PBS溶液ΙΟμ ，使提取物的終濃度為lOOPg/mL，lOPg/mLL，培養(yǎng)48h后，每孔加入MTT溶液(5 mg/mL) ΙΟμ ,繼續(xù)在培養(yǎng)箱中孵育4h，傾去上清液后，每孔加入DMSOIOOPL，振蕩后用酶標(biāo)儀于570nm處測(cè)定各孔吸光度值。同時(shí)設(shè)定空白組(以同體積的PBS代替提取物)，根據(jù)下面公式計(jì)算細(xì)胞存活率(Cell viability)=(提取物組OD值/空白組OD值)X 100%。所得結(jié)果見表I。表I牛大力各極性部位對(duì)成骨細(xì)胞增殖的影響
權(quán)利要求
1.一種牛大力提取物，其特征是將牛大力的根烘干并粉碎成粉末，然后用醇回流提取，過濾提取液，減壓回收盡溶劑，獲得浸膏狀牛大力提取物。
2.一種牛大力極性部位提取物，其特征在于取權(quán)利要求1所述的牛大力提取物加水稀釋，按順序用石油醚、氯仿和乙酸乙酯依次萃取，將乙酸乙酯萃取液或萃取后剩余的水溶液減壓濃縮至浸膏狀，真空干燥得到的粉末即為牛大力乙酸乙酯部位提取物、牛大力水相部位提取物。
3.權(quán)利要求1或2所述的牛大力提取物、牛大力乙酸乙酯部位提取物、牛大力水相部位提取物在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。
4.根據(jù)權(quán)利要求3所述的應(yīng)用，其特征在于所述治療骨質(zhì)疏松藥物是將牛大力提取物與常規(guī)輔料配合，采用現(xiàn)有工藝制得的臨床上允許的內(nèi)用制劑。
5.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述常規(guī)輔料是溶劑、崩解劑、矯味劑、防腐劑、著色劑、粘合劑、潤滑劑、潤濕劑、增稠劑、增溶劑或基質(zhì)。
6.根據(jù)權(quán)利要求4所述的應(yīng)用，其特征在于所述內(nèi)用制劑是散劑、顆粒劑、片劑、膠囊齊U、丸劑、口服液、分散片、噴霧劑、靜脈注射劑、肌肉注射劑、吸入劑或凝膠劑。
7.權(quán)利要求1或2所述的提取物與祛風(fēng)濕藥、利水滲濕藥、活血化瘀藥、補(bǔ)虛藥中的一種或一種以上的藥物組成復(fù)方藥劑。
全文摘要
本發(fā)明公開了一種牛大力提取物及其在制備治療骨質(zhì)疏松藥物中的應(yīng)用。所述牛大力提取物是將牛大力的根烘干并粉碎成粉末，然后用醇回流提取，過濾提取液，減壓回收盡溶劑，獲得浸膏狀牛大力提取物。在藥效試驗(yàn)基礎(chǔ)上，發(fā)現(xiàn)牛大力提取物在治療骨質(zhì)疏松上具有良好的藥效，可以用來制備治療骨質(zhì)疏松藥物，為骨質(zhì)疏松的治療提供有效途徑，其制備方法簡單，成本低。
文檔編號(hào)A61K36/486GK103040924SQ20131001134
公開日2013年4月17日 申請(qǐng)日期2013年1月14日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月14日
發(fā)明者韓長日, 陳光英, 張金超, 舒火明, 王呈文 申請(qǐng)人:海南師范大學(xué), 河北大學(xué)