專利名稱：白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用的制作方法
技術(shù)領(lǐng)域：
本發(fā)明涉及白簕多糖的一種新用途，具體涉及白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
背景技術(shù)：
目前，糖尿病已成為繼腫瘤、心血管病變之后第三大嚴(yán)重威脅人類健康的慢性疾病，糖尿病在發(fā)達(dá)國家以及發(fā)展中國家均是一個(gè)日益嚴(yán)重的問題，它造成了嚴(yán)重而代價(jià)巨大的后果，包括失明、心臟病、腎病以及糖尿病引起的并發(fā)癥。目前，在我國40歲以上人群中糖尿病患病率為5.89%，且呈明顯的上升趨勢(shì)，根據(jù)國際糖尿病聯(lián)盟的估計(jì)，在未來20年內(nèi)中國的糖尿病患者數(shù)目將突破5000萬。現(xiàn)在的糖尿病有擴(kuò)大化和年輕化的傾向，如何防治糖尿病已成為目前醫(yī)藥界重點(diǎn)關(guān)注的一大課題。目前市面上推廣使用的治療糖尿病藥物，其作用機(jī)制主要:1)刺激胰島細(xì)胞分泌胰島素；2)降低腸道對(duì)葡萄糖吸收；3)抑制肝糖產(chǎn)生；4)增強(qiáng)周緣組織對(duì)胰島素敏感性。且現(xiàn)有的糖尿病治療藥物仍以西藥為主，而西藥比較常見的缺點(diǎn)是具有耐藥性和副作用，同時(shí)現(xiàn)有市面可見的糖尿病治療西藥，副作用小的通常價(jià)格較高。白簕(Acanthopanantrifoliatus ( L.) Merr.)又稱鵝掌簕、三加皮、刺三加等為五加科(Araliaceae)五加屬(Acant hopanan )攀援狀灌木。白簕化學(xué)成分豐富，含有黃酮、皂苷、強(qiáng)心苷、多糖、香豆素等藥用成分。白簕中多糖含量高，尤其是莖部的多糖含量，目前尚沒有白簕多糖具有降低血糖的活性的報(bào)道。

發(fā)明內(nèi)容
本發(fā)明的 目的在于為現(xiàn)有制備治療糖尿病藥物技術(shù)領(lǐng)域提供一種新途徑，提供白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。本發(fā)明采用的技術(shù)方案是:
白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。優(yōu)選的，白簕多糖的提取工藝:將干燥的白簕藥材粉碎，然后水提，得到的水提液依次進(jìn)行濃縮、除蛋白、醇沉、過濾、干燥，得白簕多糖。優(yōu)選的，水提方法:向粉碎后的白簕中加3 5倍重量的水，70 90°C水浴浸提，過濾，得水提液。優(yōu)選的，除蛋白方法:向濃縮后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為15 25萬IU/g干燥的白簕藥材，40 60°C水浴，然后加熱除酶。優(yōu)選的，白簕多糖的提取工藝:將干燥的白簕藥材粉碎，加入3 5倍重量的水，70 90°C水浴浸提5 7 h，過濾，得到的水提液濃縮，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為15 25萬IU/g干燥的白簕藥材，40 60°C水浴3 5 h，然后加熱除酶，冷卻后，力口入75 95%乙醇進(jìn)行醇沉，過濾，干燥，得白簕多糖。優(yōu)選的，白簕多糖的提取工藝:將干燥的白簕藥材粉碎，加入40倍重量的水，80°C水浴浸提6 h，過濾，得到的水提液濃縮，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為20萬IU/g干燥的白簕藥材，50°C水浴4 h，然后加熱除酶，冷卻后，加入95%乙醇進(jìn)行醇沉，過濾，干燥，得白簕多糖。優(yōu)選的，白簕藥材為五加科五加屬植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.)Merr.的根、根皮、莖、葉中的至少一種。優(yōu)選的，白簕藥材為五加科五加屬植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.)Merr.的莖。由于白簕(五加科五加屬植物 Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.) 部的多糖含量最高，優(yōu)選從白簕莖部提取多糖。優(yōu)選的，白簕莖多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，所述白簕莖多糖是從五加科五加屬植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的莖中提取的多糖。優(yōu)選的，白簕多糖與藥學(xué)上可接受的輔料相結(jié)合，制備成任何一種藥學(xué)上可接受的劑型。本發(fā)明通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說明白簕多糖可明顯增加糖尿病小鼠的體重，白簕多糖高低兩個(gè)劑量組的體重與二甲雙胍組相比，體重的增長率較為接近，說明白簕多糖對(duì)體重的恢復(fù)能力與二甲雙胍接近。本發(fā)明通過動(dòng)物實(shí)驗(yàn)說明白簕多糖不影響正常小鼠的血糖。白簕多糖低、高劑量組對(duì)小鼠的血糖恢復(fù)效果明顯，高劑量組的血糖恢復(fù)效果最好，與對(duì)照藥物二甲雙胍的治療效果最為接近，其血糖值和正常組相比無顯著性差異，說明白簕多糖具有較好的降血糖作用。本發(fā)明的有益效果是:
本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證明，白簕多糖可明顯增`加糖尿病小鼠的體重，其對(duì)體重的恢復(fù)能力與二甲雙胍接近，還證明白簕多糖具有較好的降血糖作用，白簕多糖不影響正常小鼠的血糖，且對(duì)糖尿病小鼠的血糖恢復(fù)效果明顯，高劑量組與對(duì)照藥物二甲雙胍的治療效果最為接近。而白簕是一種純天然的植物，傳統(tǒng)中藥的耐藥性通常較低，在糖尿病治療過程中增添重要的使用，可降低西藥帶來的副作用；且白簕中多糖含量最高的是其莖部，具有價(jià)格低廉的優(yōu)點(diǎn)，因此白簕降糖作用的開發(fā)具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
具體實(shí)施例方式下面結(jié)合具體的實(shí)驗(yàn)對(duì)本發(fā)明作進(jìn)一步的說明，但并不局限于此。白簕多糖的提取
稱取干燥的粉狀的白簕藥材(五加科五加屬植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.)Merr.的莖)430g,加入4倍重量的蒸餾水，80°C恒溫水浴鍋中浸提6h，過濾殘?jiān)?，再抽濾濾液以去除沉淀，在80°C下濃縮至原來溶液體積的1/4，向濃縮后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為20萬IU/g干燥的粉狀的白簕藥材，50°C水浴4h，加熱除酶(100°C置于30s)，冷卻后，加4倍體積的95%乙醇進(jìn)行醇沉，置于4°C過夜，3500r/min離心lOmin，取沉淀，然后抽濾、烘干，得到白簕多糖，4°C密封干燥保存。按蒽酮-硫酸法測(cè)定所得白簕多糖中多糖含量為46.6%，按原料白簕藥材重量計(jì)，白簕多糖中多糖含量為9.203mg/g。糖尿病小鼠模型的制作取80只20 22g健康昆明種雄性小鼠適應(yīng)性喂養(yǎng)三天，禁食(不禁水)8小時(shí)，一次性腹腔注射鏈脲佐菌素(STZ) 150mg/kg，對(duì)照組注射等體積生理鹽水，72h后，禁食12h，剪尾取血采用血糖儀測(cè)定空腹血糖值，以血糖值大于11.lmmol/L的小鼠為糖尿病小鼠,選取STZ造模成功的小鼠進(jìn)行降血糖實(shí)驗(yàn)。實(shí)驗(yàn)分組及處理
將昆明種雄性小鼠分為6組:正常對(duì)照組、高血糖模型組、二甲雙胍治療組、白簕多糖低劑量、高劑量治療組、白簕多糖高劑量對(duì)照組，每組9只小鼠。其中，二甲雙胍治療組灌胃125 mg.kg—1.Cf1 二甲雙胍，白簕多糖高、低劑量治療組分別灌胃200 mg.kg—1.d'lOOmg.kg-1.(Γ1白簕多糖，白簕多糖高劑量對(duì)照組灌胃200 mg.kg-1.cf1白簕多糖,正常對(duì)照組和高血糖模型組灌胃等體積生理鹽水，正常對(duì)照組和白簕多糖高劑量對(duì)照組的小鼠均為正常小鼠，非糖尿病小鼠，其余各組小鼠均為STZ造模成功的小鼠，即糖尿病小鼠。各組小鼠自由飲水進(jìn)食，連續(xù)給藥14天。最后一次給藥后禁食12h，剪尾取血，通過血糖儀測(cè)定空腹血糖。測(cè)定后，心臟取血，并解剖摘取肝、脾、腎及胸腺四個(gè)臟器，稱重。血清分離，用試劑盒測(cè)定小鼠的生化指標(biāo)。數(shù)據(jù)處理
各組實(shí)驗(yàn)結(jié)果以表示，采用SPSS(17.0)軟件進(jìn)行t檢驗(yàn)，比較組間差異，P〈0.05為顯著性差異，P<0.01為極顯著性差異。白簕多糖對(duì)小鼠體重的影響:
通過14天的持續(xù)觀察，實(shí)驗(yàn)發(fā)現(xiàn)正常小鼠的體重均快速增加至約30g后處于穩(wěn)定狀態(tài)，且活動(dòng)敏捷，毛色更有光澤。STZ造模72h后，糖尿病小鼠均出現(xiàn)“三多一少”的典型癥狀，即飲水增多、進(jìn)食增多、排尿增多、體重減輕。隨著白簕多糖及二甲雙胍的治療進(jìn)行，“三多一少”的癥狀逐漸緩解，體重逐步緩慢增加，而高血糖模型組小鼠體型消瘦，體重明顯較低。各組連續(xù)給藥14天后，各組小鼠的體重結(jié)果見表I和表2。
權(quán)利要求
1.白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
2.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于:白簕多糖的提取工藝:將干燥的白簕藥材粉碎，然后水提，得到的水提液依次進(jìn)行濃縮、除蛋白、醇沉、過濾、干燥，得白簕多糖。
3.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其特征在于:水提方法:向粉碎后的白簕中加3 5倍重量的水，70 90°C水浴浸提，過濾，得水提液。
4.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其特征在于:除蛋白方法:向濃縮后的水提液中加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為15 25萬IU/g干燥的白簕藥材，40 60°C水浴，然后加熱除酶。
5.根據(jù)權(quán)利要求2的應(yīng)用，其特征在于:白簕多糖的提取工藝:將干燥的白簕藥材粉碎，加入3 5倍重量的水，70 90°C水浴浸提5 7 h，過濾，得到的水提液濃縮，加入木瓜蛋白酶，木瓜蛋白酶的加入量為15 25萬IU/g干燥的白簕藥材，40 60°C水浴3 5h，然后加熱除酶，冷卻后，加入75 95%乙醇進(jìn)行醇沉，過濾，干燥，得白簕多糖。
6.根據(jù)權(quán)利要求2 5任一項(xiàng)所述的應(yīng)用,其特征在于:白簕藥材為五加科五加屬植物 Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的根、根皮、莖、葉中的至少一種。
7.根據(jù)權(quán)利要求6所述的應(yīng)用，其特征在于:白簕藥材為五加科五加屬植物Acanthopanax trifoliatus (Linn.) Merr.的莖。
8.根據(jù)權(quán)利要求7所述的應(yīng)用，其特征在于:白簕莖多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用。
9.根據(jù)權(quán)利要求1的應(yīng)用，其特征在于:白簕多糖與藥學(xué)上可接受的輔料相結(jié)合，制備成任何一種藥學(xué)上可 接受的劑型。
全文摘要
本發(fā)明公開了白簕多糖在制備治療糖尿病藥物中的應(yīng)用，本發(fā)明通過實(shí)驗(yàn)證明，白簕多糖可明顯增加糖尿病小鼠的體重，其對(duì)體重的恢復(fù)能力與二甲雙胍接近，還證明白簕多糖具有較好的降血糖作用，白簕多糖不影響正常小鼠的血糖，且對(duì)糖尿病小鼠的血糖恢復(fù)效果明顯，高劑量組與對(duì)照藥物二甲雙胍的治療效果最為接近。而白簕是一種純天然的植物，傳統(tǒng)中藥的耐藥性通常較低，在糖尿病治療過程中增添重要的使用，可降低西藥帶來的副作用；且白簕中多糖含量最高的是其莖部，具有價(jià)格低廉的優(yōu)點(diǎn)，因此白簕降糖作用的開發(fā)具有極高的經(jīng)濟(jì)價(jià)值。
文檔編號(hào)A61K31/715GK103070880SQ20131003560
公開日2013年5月1日 申請(qǐng)日期2013年1月30日 優(yōu)先權(quán)日2013年1月30日
發(fā)明者潘育方, 楊慧文, 劉莉 申請(qǐng)人:廣東藥學(xué)院