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一種注射用新藤黃酸制劑及其制備方法、應用的制作方法
專利名稱:一種注射用新藤黃酸制劑及其制備方法、應用的制作方法
技術領域:
本發(fā)明涉及的是一種中藥制劑,特別是涉及新藤黃酸、含有它的制劑及其制備方法。
背景技術:
藤黃為藤黃科植物樹分泌的干燥樹脂,美國藥典曾收載該品,其活性成份主要為藤黃、新藤黃酸。1984年呂歸寶等首次從藤黃樹脂中分離得到另一種新的酸性成分,并將其命名為新藤黃酸(Neogambogic acid)。以后對新藤黃酸的研究工作不斷深化。曲寶璽等通過實驗表明新藤黃酸對S180、ARS腹水癌、Lewis肺癌、白血病P388、肺腺癌等實體癌均有較好的抑制作用,并有一定的選擇性抗轉移作用,毒性實驗還表明新藤黃酸具有比藤黃酸毒性低的特點。因此將其作為抗腫瘤藥物和目前市場上常用的抗癌藥物相比具有特殊優(yōu)勢。
現有的專利技術中,公開號CN1309125A(申請?zhí)?1108049.3),中國藥科大學的專利《具抗癌活性的藤黃酸類化合物的復合物及其制備方法》主要提出以藤黃酸類化合物和金屬離子、C1-C8含N有機堿、氨基酸形成復合物的制備方法。金彪等人提出了藤黃酸類化合物(含新藤黃酸)與含N有機堿如普魯卡因、月桂胺、葡甲胺、氨基葡萄糖等形成鹽類化合物及其制備方法(申請?zhí)?2124510.X,
公開日2003年1月15日;公開號CN 1470516A,申請?zhí)?2126647.6;公開號CN 1498889A,申請?zhí)?21148321.3)。王樹龍的專利提出新藤黃酸系列衍生物主要以脂化物、酰胺類化合物(申請?zhí)?00410033298.2,
公開日2005年1月12日)。雖然以上的專利解決了新藤黃酸的水溶性問題,但是其穩(wěn)定性和有效性稍有欠缺,容易受到濕度、溫度、光照的影響而氧化分解,這些均給新藤黃酸在實際生產和臨床應用中帶來種種障礙和限制。
本發(fā)明所涉及的新藤黃酸制劑不僅解決了水溶性的問題,而且將新藤黃酸制備成凍干注射劑。提高了其穩(wěn)定性和有效性,從而滿足臨床用藥的需要。
發(fā)明內容
本發(fā)明針對上述不足之處提供一種注射用新藤黃酸制劑及其制備方法,該制劑配方改進了上述制劑的缺陷,且運用冷凍干燥新技術工藝制備成凍干注射劑,具有良好的溶解性和穩(wěn)定性,并且經濟實用,治療效果優(yōu)良。
一種注射用新藤黃酸制劑及其制備方法是采用以下方案實現一種注射用新藤黃酸制劑,其特征是以新藤黃酸為活性成分,其余成分為助溶劑,賦形劑,注射用水,其原料重量分配比范圍新藤黃酸1~~~50份助溶劑0.5~~~50份賦形劑0.5~~~100份注射用水0~~~5000份注射用新藤黃酸制劑原料優(yōu)選重量分配比范圍新藤黃酸10~~~50份助溶劑10~~~50份賦形劑1~~~~60份注射用水0~~~~4000份注射用新藤黃酸制劑原料優(yōu)選重量分配比范圍新藤黃酸20~~~30份助溶劑15~~~25份賦形劑30~~~50份注射用水0~~~3000份注射用新藤黃酸制劑可以是注射劑、凍干注射劑。
助溶劑選用L-精氨酸、葡甲胺、賴氨酸中的一種或其任意組合,經穩(wěn)定性實驗以L-精氨酸最佳。賦形劑選用甘露醇、右旋糖氯化鈉中的一種或其任意組合,經比較以甘露醇最佳。
注射用新藤黃酸制劑制備方法,其特征在于按重量份配比稱取原料藤黃酸1~50份,加入注射用水0~5000份攪勻,加入助溶劑0.5~50份,超聲溶解至澄清,加入賦形劑0.5~100份,攪拌溶解,加入活性炭,攪拌、脫炭、過濾、灌裝,即制成新藤黃酸注射劑,將新藤黃酸注射劑冷凍干燥,即制成新藤黃酸凍干注射劑。
上述注射用新藤黃酸制劑制備方法中助溶劑選用L-精氨酸、葡甲胺、賴氨酸中的一種或其任意組合;賦形劑選用甘露醇、右旋糖苷、氯化鈉中的一種或其任意組合。
前面所述的任意組合是指在三種組分中的任意一種,或任意二種、三種的任意比例組合物。
上述注射用新藤黃酸制劑在制備一種抗腫瘤藥物中的應用。
本發(fā)明所用原料新藤黃酸具有抗腫瘤作用,本發(fā)明所用新藤黃酸可使用背景技術中的方法制備,也可使用如下方法制備。
本發(fā)明注射用新藤黃酸制劑配方的篩選新藤黃酸為淺黃色結晶性粉末,在乙醇、甲醇等有機溶劑中溶解,水中不溶,在堿性溶液中如氫氧化鈉溶液中溶解,但不穩(wěn)定,易水解,故選擇助溶劑是解決問題的有效途徑。我們選擇了多種助溶劑如氫氧化鈉、碳酸氫鈉、泊拉沙姆、吐溫80、菸酰胺、葡甲胺、L-精氨酸、谷氨酸、賴氨酸等,在0.1mol/L氫氧化鈉中和碳酸氫鈉中溶解最快,溶液在數小時后顏色變深,發(fā)生了氧化分解。表面活性劑對本品助溶效果不明顯,L-半胱氨酸、谷氨酸、甘氨酸助溶不佳,L-精氨酸及賴氨酸助溶較好,水溶液放置數天顏色基本不變,含量變化較小,葡甲胺次之。所以選擇L-精氨酸為本品的最佳助溶劑,結果見下表。
表1 新藤黃酸選用助溶劑的試驗結果(新藤黃酸100mg;10ml)
本制劑主藥每瓶為20mg,不加賦形劑,凍干后呈網狀,松散,易碎,所以我們進行了賦形劑的篩選,選擇的賦形劑有甘露醇、乳糖、右旋糖苷、氯化鈉,葡萄糖,結果見表2。
表2 賦形劑的篩選結果
本發(fā)明的注射用新藤黃酸配方的組合物經過穩(wěn)定性對比實驗,證明具有更加優(yōu)良的穩(wěn)定性。不加L-精氨酸的溶液,在經過一定時間后溶液變得渾濁,同樣時間內,加入了L-精氨酸的溶液不變,另外,在高濕高熱條件下,上述組合物也表現出非常的穩(wěn)定性。加入了L-精氨酸大大提高了溶解度,也使穩(wěn)定性提高。
本發(fā)明的新藤黃酸制劑具有良好的抗腫瘤作用,以下通過實驗例說明本發(fā)明的有益效果。
實例1注射用新藤黃酸體外抑瘤實驗一.實驗材料1.實驗動物注射用新藤黃酸,規(guī)格20mg/支2.瘤株A人乳腺癌MCF-7,B人肝癌BEL-7402,C人宮頸癌HELA二 實驗方法參照腫瘤細胞體外篩選法中相關方法,將指數生長期的人乳腺癌MCF-7、人肝癌BEL-7402、人宮頸癌HELA三種細胞以3000~5000個/180/孔,接種于96孔板內,次日用培養(yǎng)液稀釋藥物,每20ul加入孔內,使其終濃度為0.1、0.2、0.5、1.0、2.0、5.0、10、20、50ug/ml,每稀釋度設3孔,并設不加藥對照組和不接種細胞空白本底組。加藥后2天(藥物作用48小時)傾去培養(yǎng)液,加入MTT(SIGMA)液晶150ul(0.5ug/ml),4小時后用DMSO溶解細胞,用EL-312型酶標儀上以波長540nm測光密度吸收值OD,并計算抑制率。
公式為1-{(用藥組OD-空白本底OD)/對照組OD-空白對照}}*100%三 實驗結果1綜合四次實驗結果,按公式計算生長抑制率,結果如下表3 注射用新藤黃酸對人癌細胞生長抑制作用
2肝癌BEL-7402細胞對注射用新藤黃酸最敏感,IC50約為0.62ug/ml,乳腺癌MCF-7和宮頸癌Hela細胞次之,其IC50分別為1.15ug/ml和1.20ug/ml。
實驗2注射用新藤黃酸對小鼠移植肉瘤S180、小鼠肝癌H-22以及小鼠艾氏癌實體瘤的抑制作用。
藥物配制定量稱取注射用新藤黃酸,加入0.9%氯化鈉溶液配成所需濃度。
給藥途徑靜脈給藥給藥周期于接種后次日,隔日連續(xù)給藥兩天,每天一次,共6次。停藥后第一下處死解剖。
劑量設置共設五組A組注射用新藤黃酸組(8、4、2mg/kg)B組羥基喜樹堿組(1mg/kg)C組空白對照組(生理鹽水0.1ml/20g)小鼠類型昆明種小鼠,體重18-22克,雄性給藥體積0.1ml/20g實驗方法取上述規(guī)格小鼠50只,按移植腫瘤研究法接種,接種后24小時稱鼠體重,并隨機分為5組,每組10只,注射用新藤黃酸組設高、中、低三個劑量組,并設陽性對照組羥基喜樹堿組各陰性對照組生理鹽水組。于停藥后第一天稱重,處死并分離瘤體,稱瘤重并進行統(tǒng)計學處理(t檢驗)表4 注射用新藤黃酸IV對小鼠移植S180的抑制作用
**P<0.01 與生理鹽水對照組比較表5 注射用新藤黃酸IV對小鼠肝癌H-22的抑制作用
**P<0.01 與生理鹽水對照組比較表6 注射用新藤黃酸IV對小鼠艾氏癌實體瘤的抑制作用
**P<0.01 與生理鹽水對照組比較實驗結果結果表明與生理鹽水對照組比較,注射用新藤黃酸對小鼠移S180,小鼠肝癌H-22及小鼠艾氏癌實體瘤的生長均有明顯地抑制作用,對小鼠體重增長無明顯影響,其對瘤體的抑制作用與羥基喜樹堿注射液相當。
實驗3注射用新藤黃酸對裸鼠人肝癌7721的實驗治療作用藥物配制定量稱取注射用新藤黃酸內容物適量加入0.9%氯化鈉溶液配成所需濃度。
給藥途徑靜脈給藥。
劑量設置共五個組A組注射用新藤黃酸組(8、4、2mg/kg)B組羥基喜樹堿組(1mg/kg)
C組生理鹽水組對照組(生理鹽水0.1ml/20g)小鼠類型裸鼠,體重16-18克,6-8周齡給藥體積0.05ml/10g實驗方法取裸鼠40只,同一性別,16-18g,正常飼養(yǎng)觀察3天無異常后,在無菌條件下,腑下小塊(2mm3/塊,1塊/只)接種裸鼠人肝癌7721后隨機分組,8只/組,共5組,注射用新藤黃酸以生理鹽水溶解,配制1.2mg/ml,0.6mg/ml和0.3mg/ml三種濃度,分別用于6mg/kg,3mg/kg和1.5mg/kg即高,中,低三個劑量組。靜脈給藥,給藥體積為0.05mg/10g體重,接種后第5日開始給藥,1次/3天,共10次。同時設陽性對照(羥基喜樹堿組1mg/kg)及單純對照組(生理鹽水0.1ml/只)。末次給藥后次日處死動物稱體重,剝取腫瘤稱瘤重,計算腫瘤抑制率,并用t檢驗對數據進行統(tǒng)計學處理。
表7 注射用新藤黃酸IV對裸鼠人肝癌7721的實驗結果
**P<0.01 與生理鹽水對照組比較具體實施方式
下面的實施例可以使本專業(yè)技術人員更全面地理解本發(fā)明,但不以任何方式限制本發(fā)明。
實施例一配方1000瓶凍干注射劑,新藤黃酸25克(25重量份),L-精氨酸50克(50重量份),甘露醇40克(40重量份),注射用水2000ml(2000重量份)取處方量新藤黃酸置適宜容器中,加適量注射用水(總體積的80%),攪勻,加入L-精氨酸超聲溶解至澄清,加入甘露醇,攪拌溶解,加入1%針用炭,攪拌30分鐘,脫炭,加注射用水至足量,測定中間體含量合格后,在無菌條件下,0.22微孔濾膜過濾,濾液灌裝于10ml西林瓶中,每瓶2ml,半加塞,裝盤,送入凍干箱中,插入溫度傳感器,關閉箱門開機至干燥,密塞,出箱,扎蓋,檢查,包裝即可。
實施例二配方1000瓶注射劑,新藤黃酸25克(25重量份),L-精氨酸50克(50重量份),甘露醇40克(40重量份),注射用水2000ml(2000重量份)取處方量新藤黃酸置適宜容器中,加適量注射用水(總體積的280%),攪勻,加入L-精氨酸超聲溶解至澄清,加入甘露醇,攪拌溶解,加入1%針用炭,攪拌30分鐘,脫炭,加注射用水至足量,測定中間體含量合格后,在無菌條件下,0.22微孔濾膜過濾,濾液灌裝于10ml西林瓶中,每瓶2ml。
實施例三配方1000瓶凍干注射劑,新藤黃酸50克(50重量份),賴氨酸或葡甲胺40克(40重量份),右旋糖苷或氯化鈉100克(100重量份),注射用水4000ml(4000重量份)取處方量新藤黃酸置適宜容器中,加適量注射用水(總體積的80%),攪勻,加入葡甲胺或賴氨酸超聲溶解至澄清,加入右旋糖苷或氯化鈉,攪拌溶解,加入1%針用炭,攪拌30分鐘,脫炭,加注射用水至足量,測定中間體含量合格后,在無菌條件下,0.22微孔濾膜過濾,濾液灌裝于10ml西林瓶中,每瓶4ml,半加塞,裝盤,送入凍干箱中,插入溫度傳感器,關閉箱門開機至干燥,密塞,出箱,扎蓋,檢查,包裝即可。
實施例四配方1000瓶注射劑,新藤黃酸50克(50重量份),復方氨基酸(賴氨酸+賴氨酸)或葡甲胺50克(50重量份),右旋糖苷或氯化鈉100克(100重量份),注射用水4000ml(4000重量份)取處方量新藤黃酸置適宜容器中,加適量注射用水(總體積的280%),攪勻,加入葡甲胺或賴氨酸超聲溶解至澄清,加入右旋糖苷或氯化鈉,攪拌溶解,加入1%針用炭,攪拌30分鐘,脫炭,加注射用水至足量,測定中間體含量合格后,在無菌條件下,0.22微孔濾膜過濾,濾液灌裝于10ml西林瓶中,每瓶4ml。
本發(fā)明一種注射用新藤黃酸制劑及其制備方法,該制劑配方改進了目前新藤黃酸注射劑的缺陷,具有良好的溶解性和穩(wěn)定性,并且經濟實用,具有良好的抗腫瘤作用,通過實驗例說明本發(fā)明治療效果優(yōu)良。
權利要求
1.一種注射用新藤黃酸制劑,其特征是以新藤黃酸為有效活性成分,其余為助溶劑,賦形劑,注射用水,其原料重量分配比例范圍新藤黃酸 1~~~50份助溶劑0.5~~~50份賦形劑0.5~~~100份注射用水 0~~~5000份。
2.根據權利要求1所述的注射用新藤黃酸制劑,其特征在于其原料優(yōu)選重量分配比范圍新藤黃酸 10~~~50份助溶劑10~~~50份賦形劑1~~~~60份注射用水 0~~~4000份。
3.根據權利要求1所述的注射用新藤黃酸制劑,其特征在于其原料優(yōu)選重量分配比范圍新藤黃酸 20~~~30份助溶劑15~~~25份賦形劑30~~~50份注射用水 0~~3000份。
4.根據權利要求1、2或3所述的注射用新藤黃酸制劑,其特征在于制劑是注射劑或凍干注射劑。
5.根據權利要求1、2或3所述的注射用新藤黃酸制劑,其特征在于助溶劑選用L-精氨酸、葡甲胺、賴氨酸中的一種或其任意組合,賦形劑選用甘露醇、右旋糖苷、氯化鈉中的一種或其任意組合。
6.根據權利要求1、2或3所述的注射用新藤黃酸制劑,其特征在于,助溶劑選用L-精氨酸,賦形劑選用甘露醇。
7.權利要求1所述的注射用新藤黃酸制劑制備方法,其特征在于按重量份配比稱取原料新藤黃酸1~50份加入注射用水0~5000份攪勻,加入助溶劑0.5~50份,超聲溶解至澄清,加入賦形劑0.5~100份,攪拌溶解,加入活性炭、攪拌、脫炭、過濾、灌裝,即制成新藤黃酸注射劑;將新藤黃酸注射劑冷凍干燥,即制成新藤黃酸凍干注射劑。
8.根據權利要求8所述的注射用新藤黃酸制劑制備方法,其特征在于助溶劑選用L-精氨酸、葡甲胺、賴氨酸中的一種或其任意組合;賦形劑選用甘露醇、右旋糖苷、氯化鈉中的一種或其任意組合。
9.權利要求1所述的注射用新藤黃酸制劑在制備一種抗腫瘤藥物中的應用。
全文摘要
本發(fā)明涉及的是一種含有新藤黃酸的注射用新藤黃酸制劑,其特征是以新藤黃酸為活性成分,其余成分為助溶劑,賦形劑,注射用水,其原料重量分配比例范圍藤黃酸1~50份,助溶劑0.5~50份,賦形劑0.5~100份,注射用水0~5000份。本發(fā)明還提供了注射用新藤黃酸制劑的制備工藝方法及注射用新藤黃酸制劑在制備一種抗腫瘤藥物中的應用。
文檔編號A61P35/00GK1718183SQ200510039059
公開日2006年1月11日 申請日期2005年4月22日 優(yōu)先權日2005年4月22日
發(fā)明者王效山, 黃鵬, 馮傳平 申請人:王效山
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